Estudo de condições de cultivo para produção de fragmento de anticorpo monoclonal scFv anti-Stx2 utilizando E. coli recombinante

• Processo: 21/12282-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Jose Geraldo da Cruz Pradella
• Beneficiário: Rafaela Vieira de Carvalho
• Instituição Sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Assunto(s): Biofármacos Anticorpos monoclonais Anticorpos de cadeia única Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinética de bioprocesso | expressão de proteína recombinante | Fragmentos de anticorpos monoclonais | Biotecnologia e Bioprocessos

Resumo

Linhagens de Escherichia coli produtoras da toxina de Shiga (STEC) podem causar colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica pela produção da citotoxina de Shiga (Stx), uma toxina que inibe a síntese proteica por agir no rRNA, levando à morte celular. Por não existir antídoto disponível, a terapia atual envolve apenas o tratamento dos sintomas. Fragmentos de anticorpos monoclonais tem se tornado uma importante classe de biofármacos disponíveis atualmente, apresentando diversas vantagens sobre o anticorpo convencional, como seu tamanho reduzido, ideal para a produção em larga escala em sistemas microbianos, tecnologias de processamento robustas e escalabilidade para biorreatores de grande volume. Fragmentos de anticorpos monoclonais recombinantes scFv contra toxinas Stx foram descritos possuindo atividade neutralizante para uso em diagnóstico e terapêutico contra STEC. O presente projeto tem como objetivo estudar a obtenção do fragmento de anticorpo scFv anti-Stx2 variando-se os sistemas de expressão E. coli BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys e Artic 10 recombinantes e também por meio da otimização do meio de cultura e análise das variáveis operacionais. (AU)