Colangiocarcinoma: supressor tumoral miR-101-3p como potencial biomarcador de diagnóstico e prognóstico

• Processo: 21/06315-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Dorotéia Rossi Silva Souza
• Beneficiário: Sérgio Luís Ferreira Júnior
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Gastroenterologia Genética molecular Neoplasias Colangiocarcinoma MicroRNAs Prognóstico Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Inibidores de Angiogênese | microRNA | Gastroenterologia

Resumo

Neoplasia maligna que acomete os ductos biliares, o colangiocarcinoma (CCA) possui baixa taxa de sobrevida devido as dificuldades em se detectar este tipo de câncer em seu estágio inicial. Nesse contexto, microRNAs (mRNAs) com potencial inibitório na proliferação tumoral, como o mir-101-3p, apresenta-se como potencial alvo terapêutico envolvendo diagnóstico, prognóstico e tratamento para o CCA. Objetivos - avaliar a expressão do miR-101-3p envolvido na oncogênese em pacientes com CCA e sua relação com sobrevida, hábitos de vida e comorbidades. Metodologia - serão estudados 65 pacientes com CCA e 30 indivíduos controles sem sinal clínico, bioquímico e histopatológico da doença, submetidos a colecistectomia. O perfil demográfico e clínico de ambos os grupos será obtido por questionário e prontuário eletrônico. Para análise da expressão de miR-101-3p será extraído RNA de tecido tumoral emblocado em parafina (pacientes) e tecido de ducto cístico fresco (controles), utilizando RealiaPrep" FFPE Total RNA Miniprep System (Promega) e trizol, respectivamente. A concentração e pureza serão analisadas pelo NanoDrop-ND-1000 (Thermo Scientific) e a integridade da amostra em gel de agarose 1%. A síntese de DNA complementar (cDNA) será realizada via transcrição reversa, utilizando um kit específico (Taq Man - Applied Biosystems). A análise de expressão do miR-101-3p será realizada por reação em cadeia da polimerase da transcrição reversa em tempo real (RT-qPCR). O nível de transcrição será calculado pelo método 2-Ct. Os dados serão analisados estatisticamente, de acordo com as características das variáveis, admitindo-se nível de significância para valor P<0,05.(AU)