Papel da proteína motora miosina VI na distribuição subcelular do NHE3 em túbulo proximal renal

• Processo: 21/14045-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Adriana Castello Costa Girardi
• Beneficiário: Marcos Vinícius Caetano
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/22140-7 - Bases moleculares da função e da disfunção tubular renal, AP.TEM
• Assunto(s): Fisiologia renal Interação proteína-proteína Hipertensão Microvilosidades Imunoprecipitação Pressão sanguínea Estratégias terapêuticas In vivo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Interação proteína-proteína | manuseio renal de sódio | Microvilosidades | Miosina VI | Nhe3 | Túbulo proximal | Fisiologia Renal

Resumo

A isoforma 3 do trocador Na+ /H+ (NHE3) é responsável por grande parte da reabsorção de NaCl, NaHCO3 e, consequentemente, de água, em túbulos proximais renais. Este transportador desempenha, portanto, papel essencial na homeostase ácidobase, volêmica e na determinação dos níveis de pressão arterial sistêmica. A modulação da atividade do NHE3 em resposta a estímulos é mediada por uma série de mecanismos moleculares, dentre os quais destaca-se a redistribuição do transportador entre os microdomínios da membrana apical do túbulo proximal. Embora a importância fisiológica, farmacológica e fisiopatológica da distribuição subcelular do NHE3 esteja muito bem estabelecida na literatura, os mecanismos envolvidos na translocação deste transportador da base para o corpo das microvilosidades e vice-versa permanecem obscuros. Evidências obtidas por meio de experimentos de microperfusão estacionária in vivo mostraram que a atividade da miosina VI, única miosina identificada que se move em direção à extremidade ( - ) de um filamento de actina, é essencial para mediar a inibição do NHE3 em reposta ao paratormônio, à ativação da via do cAMP/PKA e ao agonista enviesado do receptor de angiotensina II, TRV (dados não publicados). Este projeto visa elucidar os mecanismos moleculares envolvidos na redistribuição do NHE3 ao longo dos subcompartimentos da membrana apical de túbulo proximal renal em situações de inibição da reabsorção de sódio neste segmento do néfron. Para tal, serão realizados ensaios de imunoprecipitação para testar a hipótese de que o NHE3 interage com a miosina VI em túbulo proximal. Adicionalmente, serão realizados ensaios de Blue Native-PAGE para avaliar se o complexo proteico NHE3-miosina VI é modulado em resposta ao TRV. Os conhecimentos a serem obtidos neste projeto podem viabilizar e aperfeiçoar estratégias terapêuticas e farmacológicas para doenças como a hipertensão arterial. (AU)