Transcriptoma da glândula salivar de Simulium pertinax, identificação de proteínas que agem no sistema hemostático e expressão destas na forma recombinante para caracterização

• Processo: 21/11206-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Geraldo Santana Magalhães
• Beneficiário: Camila Amaro Caldeira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Transcriptoma Expressão gênica Glândulas salivares Insetos hematófagos Simuliidae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: insetos hematófagos | Proteinas recombinantes | Simulium (Chirostilbia) pertinax | sistema de expressão heteróloga | Sistema hemostático | Transcriptoma | Expressão de proteínas recombinantes

Resumo

Os insetos que se alimentam de sangue causam uma ampla gama de problemas em humanos e outros vertebrados, variando de irritações na pele à transmissão de uma variedade de patógenos que podem resultar em doença aguda, debilitação ou morte. Neste sentido, os insetos da família Simuliidae, conhecidos também como Moscas-Negras ou Borrachudos, apresentam importância médica e econômica, especialmente nas áreas rurais e litorâneas, uma vez que suas picadas causam prurido intenso e irritação e são vectores de diversas doenças, entre as quais a Oncocercose (Cegueira dos Rios) e a Mansonelose. O gênero inclui mais de 2300 espécies e no Estado de São Paulo, destaca-se o Simulium (Chirostilbia) pertinax que, devido a sua ampla distribuição, densidade e hábito hematófago voraz, tem sido submetido a campanhas de controle. Diversos compostos farmacologicamente ativos estão presentes na glândula salivar destes insetos e exercem um papel crucial para facilitar sua alimentação sanguínea como anticoagulantes, fatores antiplaquetários, vasodilatadores, imunomoduladores, anti-inflamatórios, entre outros. Devido a particularidade de agir com grande eficiência no sistema hemostático, o estudo da composição da saliva destes insetos pode ser benéfico para a descoberta de novas drogas anti-hemostáticas. Contudo, devido a pequena quantidade destas moléculas na saliva destes insetos, sua purificação é muito trabalhosa e o rendimento muito baixo, o que dificulta sua caracterização bioquímica. Assim, alguns trabalhos realizam o transcriptoma da glândula salivar com o intuito de desvendar o perfil de genes expressos, abrindo dessa forma a possibilidade de obter diversas proteínas na forma recombinante. Com esta abordagem em mente, neste projeto pretendemos realizar o transcriptoma de S. (C.) pertinax a fim de detalhar o perfil de expressão gênica da glândula salivar desta espécie e pretendemos analisar em profundidade os transcritos envolvidos no sistema hemostático e posteriormente cloná-los e expressá-los em sistema heterólogo para avaliar suas atividades biológicas. Esta abordagem poderá permitir a identificação de novas proteínas que agem no sistema hemostático e dessa forma contribuir para o desenvolvimento de drogas com atividades terapêuticas tanto para humanos quanto para animais. (AU)