Estudo das proteínas esfingosina quinase 1 e 2 na resposta à hipóxia e reoxigenação em modelo de linhagem de queratinócito oral

• Processo: 22/14844-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Andréia Machado Leopoldino
• Beneficiário: Laura Stefany Zamara
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/19103-2 - SET e esfingolipídeos em câncer de cabeça e pescoço: sinalização, alvos e terapia antitumoral, AP.TEM
• Assunto(s): Angiogênese Neoplasias bucais Esfingolipídios Hipóxia Metabolismo Microambiente tumoral Oncologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: angiogenese | cancer oral | esfingolipídios | hipóxia | metabolismo | microambiente tumoral | oncologia molecular

Resumo

A esfingosina-1-fosfato (S1P), um esfingolipídio bioativo, é produzida pela esfingosina quinase 1 (SK1) e SK2, e atua por vias de sinalização parácrina, autócrina e intracelular. Alterações nos níveis de S1P, nas enzimas SK1 e SK2, bem como nos receptores de S1P, têm sido descritas em vários tipos de câncer. Além disso, os esfingolipídios também foram reconhecidos como importantes mediadores celulares na hipóxia e angiogênese. A hipóxia é uma característica chave dos tumores sólidos associada ao pior prognóstico e maior agressividade. Embora o papel de SK1 e S1P tenha sido bastante estudado, o envolvimento da SK2 na hipóxia e reoxigenação não é bem conhecido. Nesta proposta, investigaremos o papel das esfingosinas quinases 1 e 2 (SK1 e SK2) na resposta a hipóxia e reoxigenação em modelo de linhagem de queratinócito oral (NOK) com e sem superexpressão de SK2 e SK1 em comparação à célula controle (NOK com vetor vazio). Após exposição das células às condições de hipóxia e reoxigenação, serão analisados parâmetros metabólicos, tais como captação de glucose, liberação de lactato, e celulares, como sobrevivência e estímulo de angiogênese. Analisaremos também os níveis de proteínas das principais vias de sinalização envolvidas nos processos estudados por Western blot e/ou imunofluorescência e a angiogênese por meio do ensaio de formação de túbulos utilizando células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). Espera-se que os dados obtidos contribuam para a caracterização do papel da SK2 em comparação à SK1 na hipóxia e reoxigenação e, consequentemente, definir qual esfingosina quinase tem maior relevância para os processos estudados e para o desenvolvimento do câncer oral.