Análise da participação de PIMREG nas vias de sinalização de dano ao DNA causado por radiação ionizante em células de GBM

• Processo: 22/13336-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2023
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Leticia Fröhlich Archangelo
• Beneficiário: Laís do Carmo
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia celular e molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dbs | Ddr | Gbm | Pimreg | Ri | Biologia Celular e Molecular

Resumo

PIMREG (PICALM interacting mitotic regulator) é uma proteína nuclear enriquecida no nucléolo e altamente expressa no timo e no baço. Além disso, é um substrato do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), possuindo, assim, papel de regulador mitótico. Também, sua função está relacionada à carcinogênese, uma vez que sua expressão está aumentada em vários tipos de câncer, especialmente em glioblastoma (GBM) - onde sua expressão elevada se relaciona à pior sobrevida dos pacientes e à progressão tumoral. Dados recentes do grupo mostraram que PIMREG está relacionada às vias de dano ao DNA, pois visualizou-se o aumento proteico de PIMREG em células de GBM que acumularam danos ao DNA em resposta a insultos genotóxicos, como exposição à quimioterápicos (temozolamida, hidroxiureia e cisplatina) e à radiação ionizante (RI). Ademais, o knockdown de PIMREG interferiu na sinalização das proteínas quinases ATM e em um substrato de ATR e aumentou a sensibilidade das células ao tratamento com temozolamida. Deste modo, este projeto tem como objetivo investigar a participação e o posicionamento de PIMREG nas vias de sinalização de dano no DNA, especificamente em células induzidas por RI, visto que a radioterapia é um dos tratamentos principais para GBM e induz as principais vias de sinalização ao dano de quebra de dupla fita de DNA - Recombinação Homóloga e Ligação de Extremidades Não Homólogas. Para atingir o objetivo, células de linhagem de GBM T98G parentais, com deleção (células T89G nocaute PIMREG-/-), e com superexpressão de PIMREG, serão submetidas à RI seguida de análise por Western Blot. Será verificado a expressão e a ativação de vários componentes das vias de dano e reparo e, assim será possível verificar como PIMREG pode interferir nestas vias.