Expressão e purificação de proteínas recombinantes em bactérias

• Processo: 23/03400-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Aruã Mastrangelo Prudenciatti
• Beneficiário: Helena de Oliveira Manacorda Gallindo
• CNAE: Pesquisa e desenvolvimento experimental em ciências físicas e naturais
• Vinculado ao auxílio: 22/08580-5 - Biofábrica: uma alternativa escalonável de produção de peptídeo para redução dos riscos do colesterol alto, AP.PIPE
• Assunto(s): Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Pcsk9 | Biotecnologia

Resumo

Em concordância com iniciativas mundiais de solução desta dor por farmacêuticas como Novartis e AstraZeneca, objetivamos promover alternativa terapêutica para hipercolesterolemia. Desenvolvemos durante a fase 1 deste projeto análogos peptídicos (tELH6A e tELH6A) em modelagem homóloga ao domínio A de homologia do precursor do fator de crescimento epidermal (EGF-A) do receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDL-R) para atuar como inibidor da pró-proteína convertase subtilisina/Kexin tipo 9 (PCSK9) agente responsável pela desregulação e o consequente aumento de LDL-C no plasma. Os peptídeos desenvolvidos foram otimizados através de bioinformática para 1. dotar de resistência a proteases; 2. deter estabilidade sérica aumentada; 3. possibilidade de drogabilidade oral. Desenvolveu-se clones secretores dos peptídeos de interesse em bactérias e plantas de tomateiro cv. M82. Atingiu-se marcos importantes de purificação, avaliações proteômicas e análises de toxicidade celular. Após validar com 47 players do mercado - médicos, pacientes, fundos de investimento e farmacêuticas e assinatura de term sheet - determinou-se marcos tecnológicos necessários para que o seguimento do desenvolvimento resultasse em prova de conceito robusta o suficiente para possibilitar o ganho de investimentos de outros fundos e conversas sobre transferência de tecnologia para coma indústria. Em mãos com esta oportunidade de mercado e a par das dores destes médicos e pacientes, propõe-se esta fase 2 para atingir os marcos de a. otimizar a expressão em organismos familiares à indústria farmacêutica; b. purificar com sucesso os peptídeos de interesse c. realizar análises de bioatividade in vitro, como penetrabilidade em tecidos, afinidade contra o alvo molecular (efetividade) e toxicidade celular (segurança) e c. avaliar in vivo a absorção oral e a efetividade via administração oral e intravenosa em camundongos. Os resultados, caso positivos, podem possibilitar o atendimento a mercado avaliado em U$17 bilhões e CAGR de 17.6% ao ano. O estudo será conduzido na Crop® Biotecnologia em parceria com a Universidade Estadual Paulista (UNESP).