Papel da B2m na comunicação entre macrófagos e HSPCs e seu impacto na clonalidade hematopoiética

• Processo: 23/04482-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 20 de julho de 2023
• Data de Término da vigência: 19 de julho de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Niels Olsen Saraiva Câmara
• Beneficiário: Lais Cavalieri Paredes
• Supervisor: Leonard Zon
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Boston Children's Hospital, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 20/10263-2 - Papel das histonas desacetilases na regeneração e na polarização de macrófagos pós-indução de lesão renal aguda em Zebrafish (Danio rerio), BP.DR
• Assunto(s): Hematopoiese Macrófagos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: B2M | Hematopoiese | HSCs | Macrófagos | Imunologia Aplicada

Resumo

Estudos recentes têm demonstrado o envolvimento de macrófagos embrionários na regulação do número de clones hematopoiéticos. Um macrófago pode englobar completamente uma célula-tronco ("dooming") ou pode capturar partes do material celular das HSPCs ("grooming"). No último caso, a célula-tronco passa a se dividir. Essa interação é mediada pelo "eat-me signal" calreticulina (Calr) na superfície das HSPCs. A depleção de macrófagos levou a uma redução no número de clones de células-tronco hematopoiéticas na medula adulta, sugerindo que um mecanismo de garantia de qualidade para células-tronco está funcionando. No entanto, os mecanismos moleculares que regulam o comportamento de "dooming" versus "grooming" permanecem indefinidos. Nossa hipótese é que um sinal "não me coma" pode contrabalançar o sinal "coma-me" fornecido pelo Calr, regulando assim o comportamento dos macrófagos. Nosso projeto visa investigar o papel da b2-microglobulina (B2m), uma molécula do tipo "don't eat-me", na interação entre macrófagos e HSCs e avaliar seu impacto no equilíbrio dos clones de células-tronco hematopoiéticas. Pretendemos usar o zebrafish como organismo modelo a partir de linhagens transgênicas que nos permitam avaliar por microscopia de fluorescência a interação entre os dois tipos de células e o número de clones estabelecidos após a manipulação dos níveis de expressão das moléculas envolvidas no processo. Para avaliar a diversidade de clones após a modulação da expressão de B2m, empregaremos o sistema TWISTR, que combina mutagênese em mosaico CRISPR-Cas9 com marcação por cores de clones de HSPCs, permitindo a quantificação clonal e separação de células para posteriores ensaios de sequenciamento de maior cobertura. Este estudo terá implicações diretas para doenças sanguíneas, transplante e regulação de células-tronco em outros tecidos, reprogramando o comportamento dos macrófagos. (AU)