Explantes embrionários de tireoide como modelo para estudar os efeitos do BPA e DDE sobre a embriogênese tireoidiana

• Processo: 23/06924-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Caroline Serrano Do Nascimento
• Beneficiário: Victor Silva Luzia
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/18517-8 - Disruptores endócrinos vs. tireoide: uma abordagem epigenética sobre o desenvolvimento, diferenciação e função de tireócitos e suas repercussões no organismo, AP.JP
• Assunto(s): Embriogênese Disruptores endócrinos Glândula tireoide Fisiologia endócrina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bpa | Dde | Desenvolvimento embrionário | Desreguladores endócrinos | DOHaD | Tireóide | Fisiologia Endócrina

Resumo

Desreguladores endócrinos são substâncias químicas que interferem com a função endócrina produzindo efeitos adversos sobre o crescimento, desenvolvimento, reprodução e metabolismo, com repercussões sistêmicas em variados graus dependendo do tempo de exposição e da fase do desenvolvimento em que o indivíduo é exposto. Nos últimos anos, diferentes modelos experimentais têm sido usados com o intuito de melhor compreender os mecanismos de ação dos desreguladores endócrinos em diferentes tecidos. A tireoide é alvo da ação desreguladora de uma série de compostos utilizados pela indústria na fabricação de diferentes produtos. O desenvolvimento embrionário da tireoide é complexo. A glândula deriva da endoderme, e nossos estudos anteriores demonstraram que vários desreguladores endócrinos interferem negativamente no desenvolvimento deste tecido embrionário. Contudo, ainda não está claro como esses contaminantes agem durante o desenvolvimento da tireoide em estágios mais avançados. Sabe-se que a após a migração caudal e fixação abaixo da cartilagem cricoide da traqueia, a tireoide começa a adquirir seu formato bilobulado característico, graças à intensa proliferação celular. Ao alcançar sua posição final, o precursor tireoidiano começa a expressar os genes de diferenciação tireoidianos até completar a foliculogênese e tornar-se funcional. Em camundongos, o desenvolvimentotireoidiano termina no dia gestacional 16.5. Os explantes embrionários da tireoide mostraram-se modelos interessantes para o estudo da organogênese do tecido tireoidiano, e permitem um modelo mais fisiológico de desenvolvimento da glândula por não envolver a superexpressão de fatores transcricionais tireoidianos em células tronco embrionárias, como os protocolos atualmente disponíveis na literatura. O principal objetivo do presente estudo será investigar os mecanismos moleculares desencadeados pela exposição ao BPA e DDE sobre o desenvolvimento embrionário da tireoide. Para tanto, serão utilizados explantes de tireoides embrionárias em dois períodos gestacionais distintos, de acordo com o objetivo do experimento. Para avaliar os efeitos da exposição materna ao BPA e DDE sobre o desenvolvimento da tireoide embrionária, embriões de camundongos fêmeas prenhes (controle ou tratadas) serão removidos do útero no GD16.5, e dissecados com o auxílio de uma lupa estereoscópica. Os lobos tireoidianos serão removidos e processados. Com o intuito de se avaliar os efeitos diretos da exposição aos DEs na diferenciação embrionária da tireoide, os explantes serão coletados de camundongos fêmeas controle em GD14.5. Os explantes serão então, incubados ou não com BPA ou DDE, por 48 h. Os explantes obtidos em ambos os experimentos serão processados para obtenção de RNA, DNA ou proteína. Se modificações significativas da expressão gênica forem observadas, estudos adicionais serão realizados para avaliar se a exposição ao BPA e DDE programa a expressão gênica da tireoide através de mecanismos epigenéticos, como metilação de DNA e alterações pós-traducionais de histonas.