Avaliação do papel da via cGAS-STING na disfunção vascular induzida pela testosterona em modelo experimental de hormonização.

• Processo: 23/02962-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Cardiorenal
• Pesquisador responsável: Rita de Cassia Aleixo Tostes Passaglia
• Beneficiário: Jeimison Duarte Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/12013-1 - Efeitos da testosterona como Terapia Hormonal de Afirmação de Gênero (THAG-T) no sistema cardiovascular: mecanismos moleculares e potenciais biomarcadores de risco cardiovascular, AP.TEM
• Assunto(s): Estresse oxidativo Testosterona
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Disfunção vascular | Estresse oxidativo | Sting | Testosterona | Transgênero | Farmacologia vascular

Resumo

A hormonização com testosterona aumenta o risco cardiovascular em indivíduos transmasculinos e, em modelo experimental, promove disfunção vascular por mecanismos relacionados à imunidade adaptativa. In vivo, a testosterona induz disfunção vascular pela geração de estresse oxidativo e ativação de mecanismos inflamatórios. A via cGAS-STING, ativada indiretamente pelo dano oxidativo ao DNA, participa de processo inflamatório de fase aguda e contribui para o dano vascular em diferentes processos fisiopatológicos. O objetivo desse trabalho é avaliar se a testosterona induz disfunção vascular, por ativação da via cGAS-STING decorrente de modificações oxidativas do DNA, em modelo experimental de hormonização. Camundongos fêmeas C57/BL6 com 8 semanas de idade serão tratadas com cipionato de testosterona (48 mg/Kg/sem) por duas semanas - modelo de hormonização em fase inicial. A função vascular será avaliada por estudos de reatividade em artérias isoladas. A ativação da via cGAS-STING será inferida por Western Blot. Mecanismos inflamatórios efetores como aumento da expressão de moléculas de adesão, ativação do fator de transcrição NF-ºB, presença de infiltrado leucocitário, e produção de citocinas serão avaliados por Western Blot, imunohistoquímica e ELISA, respectivamente. O estresse oxidativo será avaliado pelo ensaio da Lucigenina, e a quantificação de 8-hidroxiganosina (8-OHG), por ELISA, será utilizada como medida do dano oxidativo ao DNA. A quantidade de DNA citosólico também será mensurada em células de músculo liso vascular (CMLV) provenientes de aortas de fêmeas tratadas com testosterona. Para avaliação da participação da via cGAS-STING na disfunção vascular, fêmeas wild type (WT) serão tratadas com testosterona+Amlexanox (inibidor da via cGAS-STING) e fêmeas deficientes para enzima STING serão tratadas com testosterona. Para avaliação do envolvimento do estresse oxidativo na ativação da via cGAS-STING, fêmeas WT serão tratadas com testoterona+Apocinina (antioxidante). Parâmetros funcionais e marcadores inflamatórios também serão mensurados em vasos isolados desses animais. CMLV de fêmeas WT serão tratadas com testosterona, e serão avaliados: geração de estresse oxidativo, dano ao DNA e ativação de processos inflamatórios. A interação entre o DNA citosólico e a cGAS será inferida por estudos de co-localização. Em uma perspectiva translacional, marcadores inflamatórios e os níveis de 8-OHG serão correlacionados com a concentração sérica de testosterona em indivíduos transmasculinos em hormonização, como possíveis preditores do prejuízo vascular induzido pela testosterona. Esperamos, com essa abordagem diversa e integrada, fornecer mecanismos importantes envolvidos nas ações cardiovasculares da testosterona, visando à otimização da hormonização com testosterona com consequente redução do risco cardiovascular em indivíduos transmasculinos.