Fosfoinositídeos e oxilipinas: uma investigação mais profunda no papel de lipídeos em infecções virais

• Processo: 23/08462-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Sayuri Miyamoto
• Beneficiário: Rosangela Silva Santos
• Supervisor: Britta Bruegger
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Heidelberg University, Alemanha
• Vinculado à bolsa: 21/13711-9 - Alterações lipídicas mediadas pelo envelhecimento na infecção por SARS-CoV-2, BP.DD
• Assunto(s): Fosfatidilinositóis Cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas Lipídeos Oxilipinas SARS-CoV-2
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fosfatidilinositois | Lc-Ms | lipídios | Ms | oxilipinas | SARS-CoV-2 | Bioquímica

Resumo

As infecções respiratórias causadas pelo coronavírus foram na última década responsáveis por três grandes surtos em 2003, 2012 e 2019. A Covid-19 causada pelo Sars-Cov-2 foi responsável por mais de 6,9 milhões de mortes. A compreensão do metabolismo viral no organismo pode levar à produção de novos medicamentos que impeçam a contaminação em níveis pandêmicos. O metabolismo lipídico tem mostrado alta relevância para infecções virais. Um estudo significativo conduzido por Bartenschlager e pelo grupo Brügger (Heidelberg, Alemanha) mostrou que os ácidos fosfatídicos são necessários para a produção de organelas de replicação do Sars-Cov-2 e da hepatite C. Além disso, resultados recentes do nosso grupo mostraram uma quantidade maior de fosfatidilinositóis (PI) em células infectadas por Sars-Cov-2 em comparação com o controle simulado. Alterações semelhantes foram observadas in vivo: Duas espécies de PI (PI 16:0/18:2 e PI 18:1/20:4) também apresentaram maiores concentrações no pulmão de hamsters sírios infectados com Sars-Cov-2 aos 3 dias após a infecção (dpi). Esses resultados sugerem uma forte correlação entre as espécies de fosfatidilinositol e seus precursores: os ácidos fosfatídicos durante a infecção viral. Outra característica importante do Covid-19 são os níveis elevados de oxilipinas, especialmente prostaglandinas, em pacientes e pulmões de hamster sírio. No entanto, esta tendência não foi observada em um modelo tradicional de cultura de células. Este projeto visa estabelecer a relação entre o fosfatidilinositol e seus produtos: os fosfoinositídeos para a produção de organelas de replicação, e avaliar o uso de organoides pulmonares derivados de pacientes como um modelo in vitro mais adequado. As análises de fosfatidilinositol e fosfoinositídeo serão analisadas por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. A caracterização dos fosfoinositídeos (PIPs) será realizada com uma etapa prévia de metilação do fosfato conforme descrito anteriormente pelo grupo Brügger (Heidelberg, Alemanha) na quantificação de monodolichyl fosfatos. A análise da oxilipinas será realizada nas condições ótimas estabelecidas pelo grupo de Miyamoto (São Paulo, Brasil). Esperamos identificar enzimas produtoras de fosfoinositídeos específicos que possam ser alvos para diminuir a replicação viral e contribuir com um modelo in vitro que irá melhorar a pesquisa translacional. (AU)