Avaliação do efeito da co-cultura com células dendríticas sobre o fenótipo e função de células CAR-T obtidas a partir de iPSC

• Processo: 22/11928-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Jose Alexandre Marzagão Barbuto
• Beneficiário: Luana Correia Croda Catharino
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/00409-0 - Investigação do efeito promovido por células que expressam MHC classe II na diferenciação de iPSC para linfócitos T CD4+, BE.EP.MS
• Assunto(s): Células dendríticas Imunoterapia Terapia baseada em transplante de células e tecidos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células CAR-T | células dendríticas | Células-tronco pluripotentes induzidas (iPSC) | imunoterapia | Terapia Celular

Resumo

Dentre as imunoterapias, a terapia com células CAR-T vem se destacando nos últimos anos devidoaos resultados promissores observados em tumores hematológicos. A inserção da molécula de CAR(do inglês Chimeric Antigen Receptor) nas células T proporciona um reconhecimento antígeno-específico e independente do MHC (do inglês Major Histocompatibility Complex). Os produtos decélulas CAR-T atualmente aprovados são obtidos a partir de fontes autólogas, mas a utilização defontes alogênicas pode contornar uma série de limitações de manufatura ainda enfrentadas, como oalto custo e longo tempo de produção, e a presença de baixos números e disfunções nas células Tdisponíveis. O uso das iPSCs (do inglês, Induced Pluripotent Stem Cells) para a geração das célulasCAR-T constitui uma alternativa interessante, dado que elas podem ser obtidas por meio dareprogramação de diferentes células somáticas, e apresentam um potencial indefinido de proliferaçãoe boa suscetibilidade à manipulação gênica. Para a diferenciação das iPSCs em células T, diferentesmetodologias já foram descritas na literatura. No entanto, limitações como a necessidade do uso defeeder-cells murinas e a geração quase que exclusiva de células TCD8+ devem ser melhorendereçadas. Portanto, este projeto tem como objetivo a obtenção de células CAR-T a partir de iPSCs por meio de uma metodologia modificada, de co-cultura com células dendríticas, visando uma melhor mimetização da apresentação de antígenos in vivo no timo e, portanto, a obtenção de tanto células TCD4+ quanto TCD8+. Duas metodologias atualmente disponíveis serão usadas como base: a de formação de organoides tímicos artificiais e a de culturas feeder-free. As células CAR-T commelhores características serão posteriormente aplicadas em modelos pré-clínicos, e a indução demodificações genéticas adicionais será avaliada.