Caracterização de Dmo2 na biossíntese de Cox2p de mitocôndrias de Saccharomyces cerevisiae

• Processo: 23/12800-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Mario Henrique de Barros
• Beneficiário: Maria Antônia Kfouri Martins Soares
• Supervisor: Martin Ott
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Gothenburg, Suécia
• Vinculado à bolsa: 22/02744-6 - Identificação de novos fatores regulatórios da tradução mitocondrial em Saccharomyces cerevisiae, BP.DD
• Assunto(s): Transporte de elétrons Mitocôndrias Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadeia Respiratória | mitocôndria | Saccharomyces cerevisiae | tradução mitocondrial | Genética-Bioquímica Mitocondrial

Resumo

Em Saccharomyces cerevisiae, o DNA mitocondrial (mtDNA) é responsável pela codificação de sete proteínas que são subunidades dos complexos OXPHOS. Cox2p, codificada pelo mtDNA, é uma das proteínas que compõem o núcleo catalítico da citocromo c oxidase e está associada a dois átomos de cobre (centro CuA). Cox2p possui dois domínios transmembrana que contam com diversas proteínas para serem corretamente inseridas na membrana interna mitocondrial, bem como o sítio CuA que recebe dois átomos de cobre em um processo mediado principalmente por Cox17p, Sco1p, Sco2p como entregadores de cobre. Após pesquisa in silico de candidatos promissores a serem caracterizados, nosso grupo focou na ORF YDL157c de Saccharomyces cerevisiae, ou DMO2, um homólogo de DMAC1 humano, que está envolvido na formação do respirassomo humano. Nosso laboratório descreveu recentemente a proteína Dmo2p não caracterizada como uma proteína moonlight que está envolvida na estabilidade da Cox2p. Foi demonstrado que Dmo2p interage com Sco1p, Sco2p e Cox2p e forma um complexo com Sco1p com peso molecular superior a 144kDa. Neste projeto, propomos caracterizar melhor o papel do Dmo2p na biossíntese de Cox2p, identificando seus interatores e proteínas proximais com uma técnica baseada em biotinilação chamada BioID, e resolvendo a estrutura do complexo compreendendo Dmo2p e outras proteínas envolvidas na biossíntese de Cox2p com criomicroscopia eletrônica.