Desenvolvimento de teste sorológico para COVID-19 por citometria de fluxo.

• Processo: 23/14700-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Viviane Fongaro Botosso
• Beneficiário: Aline da Silva Rodrigues Sobrinho
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/11946-9 - Plataforma de Inovação Tecnológica para Emergências em Saúde, AP.CCD
• Assunto(s): Citometria de fluxo COVID-19
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citometria de fluxo | Covid-19 | Teste Sorologico | imunologia

Resumo

A maioria dos testes sorológicos desenvolvidos para COVID-19 se baseou na experiência anterior dos grupos de pesquisa, a partir da epidemia de SARS-CoV em 2003. Foram desenvolvidos testes de ELISA,quimioluminescência e imunocromatografia para detecção de IgM, IgG e, em alguns casos, IgA. As proteínas virais mais utilizadas são N ou S. De maneira geral, N é mais imunogênica, conferindo maior sensibilidade aos testes. Por outro lado, S é a proteína mais divergente do genoma viral, conferindo maior especificidade aos ensaios. Um mapeamento sorológico completo envolveria, portanto, a detecção de IgM, IgG e IgA séricas específicas para as proteínas N e S, resultando na necessidade de seis imunoensaios. Ensaios de CBA (Cytometric Bead Array) para diagnóstico sorológico de COVID-19 ou de outras doenças virais não foram desenhados até o momento. O CBA envolve a utilização de beads e anticorpos fluorescentes e a leitura emcitômetro de fluxo, permitindo a detecção de vários analitos simultaneamente. Dependendo do desenho experimental e do equipamento, um único ensaio de CBA poderia substituir de quatro a seis imunoensaios para COVID-19, com alta sensibilidade e especificidade, em cerca de 4 horas, sendo útil no diagnóstico e no monitoramento da eficácia vacinal. No presente projeto, pretende-se desenvolver um teste sorológico de CBA para COVID-19, utilizando beads conjugadas aos antígenos N e S (S1-RBD), inicialmente com detecção de IgM e IgG, possibilitando seu uso nos equipamentos BD FACSCalibur, presentes na rede do Ministério da Saúde. A experiência gerada neste projeto poderá abrir portas para a ampliação do teste, bem como para o desenvolvimento de outros testes sorológicos baseados na metodologia de CBA.