Validação da expressão de lncRNA em um modelo de cultura 3D para reconhecimento da gestação

• Processo: 23/13802-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 27 de dezembro de 2023
• Data de Término da vigência: 26 de março de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávio Vieira Meirelles
• Beneficiário: Anna Eloísa Serafim Viana
• Supervisor: Marcia de Almeida Monteiro Melo Ferraz
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Ludwig Maximilian University of Munich (LMU Munich), Alemanha
• Vinculado à bolsa: 22/05369-1 - LncRNAs em Células Epiteliais e Estromais do Endométrio Bovino, BP.IC
• Assunto(s): lncRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Epithelial and stromal endometrial cells | lncRNAs | 3D model | Biologia reprodutiva; Comunicação materno-embrionária

Resumo

A mortalidade embrionária precoce é responsável por grande parte das perdas reprodutivas e ocorrem antes do reconhecimento materno da gestação em bovinos (aproximadamente no dia 16º). O IFNT secretado pelo embrião é que sinaliza para a mãe a sua presença no útero, evitando a luteólise e a perda embrionária. Para que a gestação seja mantida e a prole seja saudável é fundamental a comunicação adequada entre o concepto e o ambiente uterino. No dia 20, o concepto bovino se elonga e, durante este processo, ele depende das secreções do útero (histotrofo) para sobreviver e crescer. O endométrio sofre muitas mudanças para se tornar receptivo ao embrião, incluindo mudanças transcriptômicas, que oferecem um ambiente ideal para o desenvolvimento embrionário. Neste contexto, os lncRNAs têm se mostrado transcritos fundamentais para a regulação de muitos processos fisiológicos e patológicos a nível transcricional, pós-transcricional e translacional. Eles fazem parte de redes de co-expressão gênica que possibilitam uma avaliação mais profunda dos processos biológicos envolvidos com a fertilidade, desenvolvimento embrionário e manutenção da gestação, permitindo identificar quem está envolvido na regulação hormonal, desenvolvimento de estruturas e tecidos embrionários, interação e transferência de moléculas entre o concepto e a mãe, etc. Logo, seu estudo no contexto do ambiente uterino se revela essencial para melhor compreensão do estabelecimento e manutenção da gestação. Por isso, é importante a associação das células endometriais com os embriões através de uma co-cultura, mas para isso, um modelo in vitro mais parecido com o ambiente in vivo se mostra indispensável, e nisto entram os modelos de cultura de células tridimensional, que permitem mimetizar o ambiente fisiológico de forma muito mais adequada para o crescimento e diferenciação celular, através da mimetização da matriz extracelular in vivo, visto que apresentam melhores resultados relacionados à morfologia celular, proliferação, resposta a estímulos, diferenciação, etc. Os sistemas de cultura celular tridimensional permitem manter a arquitetura embrionária e possibilitam a interação física com o ambiente ao redor, melhorando o desenvolvimento. Assim, neste projeto, serão produzidos embriões bovinos in vitro e estes serão cultivados juntamente com uma camada de células epiteliais e estromais em um modelo 3D feito a partir de endoECM. Posteriormente, no D8 da cultura, as células epiteliais e estromais do endométrio serão coletadas para PCR e, em seguida, os lncRNAs previamente identificados e selecionados serão comparados e validados com base nos resultados preliminares da bolsa de iniciação científica do aluno no Brasil.