Participação de PIMREG no acúmulo de dano ao DNA em células de glioblastoma tratadas com temozolomida

• Processo: 23/12311-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Leticia Fröhlich Archangelo
• Beneficiário: Maria Vitória de Rizzo Gasparini
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ddr | Dsb | Gbm | Pimreg | Tmz | Câncer

Resumo

PIMREG (PICALM interacting mitotic regulator) é uma proteína localizada majoritariamente no núcleo e enriquecida no nucléolo, sendo um substrato do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), que controla a transição da metáfase para a anáfase. Sabe-se que essa proteína está presente em diversos tipos de câncer, sendo a expressão mais elevada em glioblastoma (GBM). Dados recentes do grupo mostraram que PIMREG está relacionada à sinalização de resposta a dano ao DNA (DDR) em células de GBM tratadas com agentes genotóxicos. Buscando caracterizar o papel de PIMREG em DDR em células de GBM após o tratamento com temozolomida (TMZ), serão utilizadas células das linhagens T98G e U87MG selvagem e nocaute para PIMREG em ensaios que visam avaliar o impacto da deleção de PIMREG na distribuição e ativação de proteínas de sinalização de dano no DNA e no acúmulo de diferentes tipos de danos no DNA, como quebras de dupla fita (DSBs), fita simples (SSBs) e quebras cromossômicas. Para tal, serão realizados experimentos como imunofluorescência, para marcação das proteínas envolvidas em DDR e ensaios de fragmentação de DNA, TUNEL, incorporação de IdU e ensaio de micronúcleo, para avaliação de DSBs, SSBs e quebras cromossômicas, respectivamente. Além disso, será feita a caracterização do interatoma de PIMREG após o tratamento com TMZ em células de GBM (T98G e U87MG) por análise proteômica de dados produzidos anteriormente pela aluna em estágio BEPE. Com a maior compreensão da função de PIMREG em DDR, espera-se elucidar possíveis mecanismos de resistência em GBM frente ao tratamento com quimioterápicos.