Organoselênios: atividade antifúngica e mecanismos de inibição e de morte em Cryptococcus gattii

• Processo: 23/13608-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia
• Pesquisador responsável: Kelly Ishida
• Beneficiário: Letícia Serafim da Costa
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Antifúngicos Criptococose Fatores de virulência Selênio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antifúngico | Criptococose | Cryptococcus spp | Fatores de virulência | selênio | Micologia e Antifúngicos

Resumo

Foi publicado em 2022 pela Organização Mundial da Saúde a "Lista de Patógenos Fúngicos Prioritários para Orientar Pesquisa, Desenvolvimento e Ação de Saúde Pública" e dentre as espécies citadas, na categoria de alta prioridade encontra-se as espécies do gênero Cryptococcus, responsáveis por causar a criptococose. A criptococcose é uma micose causada por Cryptococcus spp. que tem como órgão de entrada o pulmão do hospedeiro, podendo se disseminar para o sistema nervoso central, resultando na meningite criptocócica. A espécie Cryptococcus gattii é conhecida por causar a doença em pacientes imunocompetentes devido a sua capacidade de evadir das células do sistema imunológico do hospedeiro, além de apresentar maior tolerância às terapias medicamentosas utilizadas para a criptococose. Diante desse fato e da crescente resistência antifúngica, se faz necessária a busca por novas opções de terapias medicamentosas para tratar a criptococose pulmonar e a meningite criptococócica. Dentre as diversas linhas de pesquisa no que tange desenvolvimento de fármacos destaca-se a prospecção de novas moléculas e o reposicionamento de fármacos, vertentes que são seguidas pelo nosso grupo de pesquisa. Recentemente demonstramos o potencial antifúngico do organoselênio LQA_78, que demonstrou atividade inibitória in vitro e em modelo in vivo de Galleria mellonella contra as espécies C. neoformans e C. gattii, tornando assim o LQA_78 um composto líder para desenvolvimento de antifúngicos contra a criptococose. Paralelamente, o Ebselen, um organoselênio, tem sido considerado um potencial candidato contra micoses invasivas em modelo murino de aspergilose e candidíase. Sendo assim, o presente trabalho possui como objetivo identificar e demonstrar os o potencial inibitório dos compostos LQA_78 e Ebselen nas células fúngicas de C. gattii através da técnica de microdiluição em caldo sob os morfotipos de C. gattii e através da ação dos compostos em fatores de virulência, como a produção de melanina, da atividade da enzima lacase e da quantificação de componentes da parede celular. Será feito também, a investigação dos mecanismos de morte dos compostos analisando o potencial de membrana mitocondrial por Rodamina123, espécies reativas de oxigênios por Diacetato de 2'7'- Diclorofluorescina, a fragmentação do DNA por TUNEL e a condensação da cromatina por Hoechst 33342. Posteriormente, será realizada e avaliada a expressão gênica de fatores de virulência e tolerância de C. gattii frente ao tratamento com LQA_78 ou Ebselen. Por fim, será avaliada a ação de ambos os compostos em modelo murino de criptococose, no qual os animais infectados e tratados serão avaliados posteriormente através de análise histopatológica e contagem de unidade formadora de colônia dos pulmões e cérebro. Portanto, esperamos que o atual projeto contribua para apresentar novas perspectivas de tratamentos para a criptococose, bem como para ampliar o conhecimento no que se refere a uso de organoselênios no tratamento de infecções fúngicas.