Aquisição e análise de imagens de microscopia confocal para avaliação dos efeitos do bloqueio meiótico na maturação epigenética oocitária e comunicação intrafolicular

• Processo: 24/03347-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Lawrence Charles Smith
• Beneficiário: Helena Fabiana Reis de Almeida Saraiva
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/09886-8 - Maturação epigenética do oócito e totipotência: o potencial do oócito e sua relação com o nicho folicular ovariano, AP.SPEC
• Assunto(s): Células-tronco Clonagem Embriologia Epigenômica Oogênese Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células tronco | clonagem | embriologia | epigenética | Oogênese | totipotência | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

A avaliação visual acurada de alterações epigenéticas e estruturais que ocorrem no oócito durante o processo de maturação in vitro requer o emprego de técnicas refinadas de microscopia, como por exemplo a microscopia confocal. Neste plano de atividades, a proposta é desenvolver e implementar técnicas avançadas de microscopia confocal que atendam às demandas científicas da Parte II do Projeto SPEC. Esse segmento do projeto avalia as alterações epigenéticas que ocorrem no gameta feminino quando da adoção de protocolos de bloqueio meiótico, e também seus efeitos sobre a comunicação no complexo cumulus-oócito via alterações estruturais em projeções transzonais. Propomos desenvolver metodologias utilizando o microscópio confocal MICA (EMU 2022/15066-0), com avaliação de amostras fixadas ou in vivo (live cell imaging), com um sistema de atmosfera controlada que permite a aquisição sequencial de imagens durante o cultivo in vitro (sistema time-lapse). Tais ferramentas e estratégias serão empregadas no estudo de alterações celulares que ocorrem durante a maturação oocitária (incluindo a progressão meiótica oocitária e a comunicação cumulus-oocitária) ou durante as primeiras clivagens embrionárias. Além disso, o equipamento EMU permitirá empregar a microscopia confocal em variados tipos de amostras e análises, atendendo às necessidades de outros projetos.