Ocorrência de clostridioides difficile nas fezes de potros

• Processo: 24/01072-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
• Pesquisador responsável: Alexandre Secorun Borges
• Beneficiário: Thais Fernanda Ribeiro
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Diarreia Enterite Potros
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diarréia | enterite | potros | clínica médica de grandes animais

Resumo

Clostridioides difficile é um dos principais agentes etiológicos responsáveis por doenças gastrointestinais em humanos e animais, denominada infecção pelo C. difficile (CDI). É uma bactéria gram-positiva, anaeróbia, flagelada e formadora de esporos que acomete diferentes espécies de animais e seres humanos. A virulência é atribuída a duas principais toxinas, a toxina A (TcdA) e a toxina B (TcdB), com algumas cepas produzindo toxina binária (CDT). Em potros, a CDI possui manifestações clínicas variadas desde diarreia leve até enterocolite hemorrágica hiperaguda, e colite profusa em equinos adultos. O diagnóstico, é realizado com base no isolamento de C. difficile, seguido pela detecção de genes que codificam TcdA e TcdB. A importância de C. difficile em potros é bem reconhecida, mas no Brasil ainda existem poucos trabalhos estudando esta bactéria em equinos. O objetivo do presente estudo é determinar a eliminação de C. difficile nas fezes de potros neonatos ao longo do tempo. Serão colhidas amostras de fezes de potros (n=100) de haras (n=5) da região de Botucatu, São Paulo em três momentos diferentes: 7, 30 e 60 dias de vida. As amostras serão inoculadas em caldo de frutose não seletivo suplementados com 0,1% de taurocolato de sódio por oito dias. Posteriormente serão semeadas em ágar CDMN em condição de anaerobiose por cinco dias. As colônias com morfologia e odor característico serão submetidas à confirmação, e as positivas serão subcultivadas. Será realizada a extração de DNA bacteriano, e realização da multiplex PCR para determinação dos genes constituintes (16sRNA) e produtores de toxinas (tcdA, tcdB, cdtA e cdtB). Para a realização da ribotipagem as amostras serão submetidas a PCR convencional com análises de fragmentos por eletroforese capilar e submissão dos resultados a um banco de dados já consolidado. Será realizada análise estatística para determinação da influência do tempo de vida e de fatores epidemiológicos para detecção do agente e de suas toxinas.