Estudo funcional e estrutural de proteína metabólicas no entendimento como alvo para novas moléculas, em modelos celulares

• Processo: 24/16466-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Katlin Brauer Massirer
• Beneficiário: Priscila Zonzini Ramos
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/50897-0 - INCT 2014: Centro de Química Medicinal de Acesso Aberto, AP.TEM
• Assunto(s): Enzimas Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: enzimas | proteína-avo | Biotecnologia

Resumo

Neste projeto, serão seguidos experimentos físico-químicos da enzima lisina-cetoglutarato redutase (LKR/SDH), em estudos paralelos usando proteínas recombinantes, células humanas e extratos de plantas. A via da sacaropina é a principal via para o catabolismo da lisina em eucariotos, com conservação em plantas e animais. Nesta via, a lisina é convertida em a-aminoadipato por três reações enzimáticas, duas das quais são catalisadas pela enzima bifuncional aminoadipato semialdeído sintase (AASS) e a terceira pela enzima aminoadipato semialdeído desidrogenase (AASADH). A enzima AASS é bifuncional e abriga o domínio lisina-cetoglutarato redutase (LKR) que condensa lisina e a-cetoglutarato em sacaropina e o domínio sacaropina desidrogenase (SDH) que hidrolisa a sacaropina para formar glutamato e amino adipato semialdeído. Mutações em componentes dessa via levam ao acúmulo dos metabólitos de degradação de lisina, resultando em doença epilética (PDE). Em plantas, a enzima LKR/SDH é bastante ativa a 18DAP-20DAP na semente e isso pode estar relacionado a uma maior tolerância a estresses bióticos e abióticos. Além disso, plantas de milho transgênicas superexpressando os genes LKR/SDH e mutantes serão avaliadas quanto a resposta a estresses bióticos e abióticos. O objetivo principal do projeto é entender a via da sacaropina frente a estresses bióticos e abióticos em diferentes modelos biológicos desenhando e executando experimentos de cinética enzimática da enzima LKR/SDH, e analisando plantas transgênicas e mutantes.