Avaliação da expressão de receptores glutamatérgicos no cerebelo em modelo celular de deleção da Klotho: possível papel modulatório do beta-estradiol

• Processo: 24/07231-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Neuropsicofarmacologia
• Pesquisador responsável: Elisa Mitiko Kawamoto Iwashe
• Beneficiário: Geovana Rosa Oliveira dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06009-6 - Neuroplasticidade induzida pela ativação da sinalização Klotho, Na, K-ATPase mediadores da neuroinflamação e o sistema glutamatérgico como estratégia para novos alvos terapêuticos para o envelhecimento e doenças neurodegenerativas, AP.TEM
• Assunto(s): Proteína Klotho Neurobiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Beta-estradiol | Klotho | Receptores glutamatérgicos | Neurobiologia

Resumo

A proteína Klotho está envolvida no processo de envelhecimento e em alguns processos celulares e moleculares no sistema nervoso central (SNC). No SNC, a Klotho é sintetizada por células ependimárias do plexo coróide, células de Purkinje e neurônios do hipocampo, participando de alguns processos cognitivos relacionados à memória, além de atuar na regulação da plasticidade sináptica no hipocampo. A nível celular, a Klotho apresenta papel protetor em neurônios do hipocampo e células granulares cerebelares. A expressão de Klotho é diferente entre os sexos, uma vez que camundongos machos apresentam maior expressão de Klotho no córtex cerebral e no cerebelo em relação a fêmeas. Os receptores glutamatérgicos N-metil-D-aspartato (NMDA) e ácido ¿-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazol propiônico (AMPA) participam dos mecanismos de plasticidade sináptica, na indução e manutenção da potenciação a longo prazo (LTP) e da depressão a longo prazo (LTD). Um estudo anterior mostrou que camundongos machos hipomórficos para Klotho apresentam redução na expressão proteica de GluA1 (AMPA) no cerebelo em relação a machos selvagens e fêmeas hipomórficas. O ¿-estradiol atua na regulação de algumas funções no SNC, como no crescimento dendrítico e modulação de vias associadas à neurotransmissão glutamatérgica. Portanto, o objetivo do projeto é investigar se existem alterações na expressão de subunidades dos receptores NMDA e AMPA, avaliada por meio de Western Blotting, e na morfologia neuronal, a partir de imunofluorescência, em cultura primária mista de cerebelo de ratos neonatos machos e fêmeas diante da deleção do gene da proteína Klotho, através de transfecção de RNA silenciador (siRNA-Klotho), e se a pré-exposição ao ¿-estradiol possui um papel modulatório diante da deleção da Klotho sobre a expressão destes receptores e a morfologia neuronal.