Estudo de formação de partículas lipídicas após inserção das hélices Q3 e Q4 de Coq3p de Saccharomyces cerevisiae na proteína ortóloga de Yarrowia Lipolytica

• Processo: 24/10926-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: José Ribamar dos Santos Ferreira Júnior
• Beneficiário: Esther Dantas Batista
• Instituição Sede: Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Saccharomyces cerevisiae Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Coq3p | leveduras oleaginosas | Saccharomyces cerevisiae | Biotecnologia

Resumo

Leveduras oleaginosas são microrganismos capazes de produzir e armazenar um teor superior a 20% de sua biomassa na forma de lipídios. Yarrowia lipolytica, uma levedura oleaginosa, destaca-se por sua capacidade de armazenar mais de 40% de lipídios em sua biomassa seca no formato de partículas lipídicas (LDs) e converter diversas fontes de carbono em triacilgliceróis (TAGs) e ésteres de esterol (SEs) durante a fase estacionária do crescimento. Devido a essas características, essa levedura é altamente promissora para a produção de biocombustíveis, em cujo contexto a biossíntese de ácidos graxos e a formação de TAGs e SEs são processos essenciais. Por outro lado, a ubiquinona (CoQ) é uma coenzima fundamental da cadeia respiratória em eucariotos, e sua biossíntese é operada pelas proteínas da família Coq1p-Coq11p. Um trabalho anterior do nosso grupo de pesquisa mostrou que a proteína Coq3p, envolvida em duas etapas de O-metilação, apresenta diferenças estruturais entre leveduras oleaginosas e não oleaginosas, o que corrobora com uma provável conexão entre essas variações estruturais e a produção de lipídios. Especula-se que a inserção das hélices ±3 e ±4 da Coq3p característica de Saccharomyces cerevisiae em Yarrowia lipolytica pode potencialmente reduzir a produção de lipídios. O objetivo deste projeto é, portanto, empregar técnicas de recombinação gênica, construção de mutantes e quantificação de conteúdo lipídico por microscopia de fluorescência a fim de investigar se um mutante com a inserção da estrutura relatada apresenta um fenótipo de menor produção de partículas lipídicas.