Identificação de proteínas parceiras de interação da XanB, enzima essencial para a patogenicidade de Xanthomonas citri subsp. citri

• Processo: 24/21337-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Teresa Marques Novo Mansur
• Beneficiário: Ana Elisa Moraes Rosa
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Cancro (doença de planta) Citri Virulência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancro cítrico | citri | Patogenicidade | pull-down | XanB | Xanthomonas citri subsp | Proteômica e Biologia Molecular

Resumo

O cancro cítrico é uma importante fitopatologia que acomete a citricultura mundial, gerando impactos significativos na produção de frutas cítricas, especialmente no Brasil, um dos cinco maiores produtores de citros do mundo. Entre as proteínas envolvidas na patogenicidade da bactéria causadora da doença, Xanthomonas citri subsp. citri (XAC), destaca-se a proteína XanB, uma enzima bifuncional associada à biossíntese de goma xantana e na formação de biofilme. Tal proteína foi detectada em maior quantidade na superfície de XAC em situação infecciosa (in vivo) do que não infecciosa (in vitro) em trabalhos anteriores do LBBMA-UFSCar. Este projeto objetiva investigar in vitro as interações proteína-proteína da XanB recombinante (rXanB) para identificar proteínas parceiras associadas à patogenicidade de XAC. A proteína rXanB será obtida por expressão heteróloga em Escherichia coli e usada para ensaio de Pull-down, por meio do qual será avaliada a sua interação com proteínas provenientes do lisado celular e de frações enriquecidas em periplasma das células de XAC (selvagem) e de um mutante de XAC com deleção de XanB, cultivadas em meio indutor de patogenicidade in vitro. Os perfis de interação serão analisados por SDS-PAGE e as proteínas parceiras serão identificadas por espectrometria de massas. A partir disso espera-se identificar interações que forneçam insights sobre a proteína XanB, como mecanismos de direcionamento em XAC, os quais devem divergir dos convencionalmente conhecidos, já que XanB não possui um peptídeo-sinal predito. Espera-se também ampliar a compreensão dos processos moleculares associados à patogenicidade de XAC, contribuindo para a elaboração de estratégias mais sustentáveis de controle em relação aos compostos de cobre atualmente utilizados, os quais apresentam riscos ao meio ambiente e à saúde humana.