Expressão de genes associados à produção de matriz extracelular e genes de resistência antimicrobiana em biofilmes cariogênicos in situ

• Processo: 24/21446-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Marlise Inêz Klein Furlan
• Beneficiário: Pedro Canto Bueno
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06801-1 - Matriz extracelular: da sua biologia às estratégias para o controle de biofilmes cariogênicos, AP.JP2
• Assunto(s): Biofilmes Expressão gênica Matriz extracelular Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biofilme | expressão gênica | matriz extracelular | Microbiologia Oral

Resumo

A doença cárie é mediada por biofilme e modulada por açúcares da dieta (especialmente, sacarose). Ainda é necessário entender melhor esse biofilme disbiótico e se abordagens para o restabelecimento da eubiose são eficazes. Assim, o presente projeto é vinculado à execução de um experimento em in situ (Bolsa de doutorado FAPESP 2024/05965-9) que faz parte de um auxílio em andamento (FAPESP 2021/06801-1). O experimento in situ inclui 16 participantes (modelo com aparato palatino contendo blocos dentários, cruzado, com 4 fases, com períodos de washout) que utilizarão quatro soluções de cada grupo experimental por fase, sendo elas: (1) sacarose e amido (dieta cariogênica); (2) dieta cariogênica+prolina (potencial prebiótico); (3) dieta cariogênica+nitrato de sódio (potencial prebiótico) e (4) água (controle). Serão realizadas diversas análises para a caracterização da matriz extracelular, microbiota, de vias metabólicas microbianas expressas, conteúdo mineral no fluído do biofilme e estrutura. Para o presente projeto de iniciação científica, o objetivo é avaliar a expressão de genes associados à produção de matriz extracelular e genes de resistência à antimicrobianos. Para tanto, 64 amostras dos biofilmes in situ serão submetidas ao isolamento de RNA, seguido da conversão de RNA mensageiro em cDNA. As amostras de cDNA serão avaliadas via PCR quantitativa utilizando primers específicos para genes selecionados associados à síntese e manutenção de componentes da matriz extracelular (e.g., gtfs, ftfs, gbps, dexA, fruA) e genes de resistência à antimicrobianos (e.g., mecA, tetA, rpoB). Os dados quantitativos serão analisados via estatística descritiva e inferencial (¿=0,05) e comparados com a literatura.