Imunopatogenicidade de isolados clínicos de Aspergillus nidulans

• Processo: 24/16021-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gustavo Henrique Goldman
• Beneficiário: Peter Silva Rocha
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Aspergillus nidulans Espécies de oxigênio reativas Infecção Genética microbiana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus nidulans | Doença granulomatose cronica | espécies reativas de oxigênio | infeccao | Genetica de Microorganismos

Resumo

O fungo oportunista patogênico do gênero Aspergillus ssp é a principal causa de mais de dois milhões de infecções em todo o mundo. A colonização das cepas fúngicas no hospedeiro, depende da regulação, síntese e remodelagem das proteínas que se organizam para constituir a integridade da parede celular e assim se adaptar ao estresse oxidativo celular e garantir a sua sobrevivência. A aspergilose pulmonar invasiva (AI) é uma doença causada por esses microrganismos e que acomete principalmente indivíduos imunocomprometidos ou com condições pulmonares preexistentes. As infecções por Aspergillus nidulans parece demonstrar uma preferência pelo hospedeiro da doença granulomatosa crônica (CGD), doença compreendida como uma imunodeficiência primária e hereditária da nicotinamida adenina nucleotídeo fosfato (NADPH) oxidase na qual os fagócitos falham em produzir espécies reativas de oxigênio (ROS). Embora haja relatos na literatura da patogenicidade de cepas A. nidulans no hospedeiro vertebrado, porém ainda não está claro quais características genômicas e proteômicas estão relacionadas à patogenicidade dos isolados clínicos de A. nidulans, uma vez que as informações encontradas na literatura não abrangem a grande diversidade de cepas presentes no ambiente, o que torna os dados disponíveis inconclusivos. Para abordar essa questão e obter mais informações sobre a patologia de A. nidulans, propomos avaliar a imunopatogenicidade de diferentes isolados clínicos de A. nidulans e entender sobre a sua virulência em modelos celulares e animais e entender sobre seu melhor estabelecimento em pacientes com CGD. Para isso, iremos realizar um screening de 25 cepas de A. nidulans provenientes de isolados clínicos através de experimentos de killing e viabilidade celular de macrófagos, além da dosagem de mediadores inflamatórios. Após esta caracterização, iremos infectar camundongos imunocompetentes (WT), imunossuprimidos e CGD para avaliar a curva de sobrevivência a resistência desses animais a infecção. Realizaremos também a dosagem de citocinas do soro, nos órgãos linfoides e no pulmão, além da caracterização de leucócitos circulantes e expressão de mRNA no tecido pulmonar. Iremos realizar analises genômicas e proteômicas desses isolados clínicos e avaliar o potencial de drogas antifúngicas e ao estresse oxidativo. Ao final, esperamos identificar o perfil patogênico das cepas de A. nidulans e identificar possíveis fatores de virulência que proporcionam o seu estabelecimento no hospedeiro vertebrado, além de seu melhor estabelecimento em pacientes com CGD.