Análise dos Mecanismos Oncogênicos do lncRNA RMEL3

• Processo: 24/20203-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Enilza Maria Espreafico
• Beneficiário: Marcos Benedito Adão
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias Drosophila melanogaster Inflamação RNA longo não codificante Metástase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Drosophila melanogaster | Inflamação | LncRNA | Metástase | Rmel3 | Biologia Celular do Câncer

Resumo

RMEL3 (Restricted to Melanoma 3) é um lncRNA enriquecido em melanoma, especialmente em associação com a mutação BRAFV600E e o fenótipo invasivo. Dados de interação RNA-proteína obtidos em nosso laboratório favorecem a hipótese de um papel para o lncRMEL3 como regulador positivo de BRAFV600E e negativo da via supressora de tumor de Hippo. Em uma análise global de expressão gênica por RNAseq, buscando identificar uma assinatura de genes regulados pelo lncRMEL3 na resposta ao soro, identificamos um predomínio de genes supressores de tumor, genes relacionados com invasão e metástase e conjuntos coesos de genes envolvidos na regulação da resposta imune inata e adaptativa. Os dados sugerem um papel para o lncRMEL3 na regulação do microambiente tumoral e imuno evasão do melanoma. Dada a conservação evolutiva das vias de sinalização envolvidas na progressão metastática e na resistência terapêutica do melanoma, incluindo as vias da resposta imune inata, e considerando novas análises em andamento que apontam uma conservação filogenética para o RMEL3 maior que a predita anteriormente, propomos, no presente projeto, explorar os mecanismos moleculares do RMEL3 no câncer induzido geneticamente no organismo modelo Drosophila melanogaster. A fim de gerar as linhagens transgênicas de D. melanogaster carregando cDNAs do RMEL3 humano, selecionamos três isoformas do gene (RMEL3_1, RMEL3_4 e RMEL3_1A), que serão clonadas no vetor de expressão pUAST-attB para integração dirigida no genoma. As construções plasmidiais serão microinjetadas em embriões decorionados para geração dos animais transgênicos. Após mapeamento físico dos transgenes no genoma, os animais serão cruzados com linhagens portadoras do sistema driver-GAL4 para indução da expressão dos UAS-transgenes ou FLP/FRT flip-out para geração de mosaicos teciduais, permitindo os estudos fenotípicos e de modulação da tumorigênese induzida geneticamente. O papel das isoformas de RMEL3 será explorado em relação à modulação do crescimento hiperplásico, da progressão tumoral invasiva e metastática, do microambiente tumoral inflamatório e da resposta imune inata sistêmica.