Caracterização do interactoma da proteína Nek8 usando identificação de biotina dependente de proximidade (BioID)

• Processo: 24/22038-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Kauany de Oliveira Ferreira
• Supervisor: Gagan D Gupta
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Toronto Metropolitan University (TMU), Canadá
• Vinculado à bolsa: 23/15911-0 - Nek8, uma serina/treonina quinase reguladora do ciclo celular: estudo funcional de mutações encontradas em câncer de cólon humano, BP.MS
• Assunto(s): Interação proteína-proteína Mutação Proteínas quinases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Interação proteína-proteína | Mutações | Proteina quinase | mecanismos de sinalização, câncer

Resumo

O ciclo celular eucariótico é regulado por uma cascata de mecanismos que garantem sua integridade, em particular, a interfase (fases G1, S e G2) e a mitose. As proteínas quinases, incluindo as quinases relacionadas ao NIMA (Neks), desempenham papéis cruciais na regulação do ciclo celular. Nek8, um membro da família Nek, está envolvido na organização centrossomal e na formação primária do cílio, com mutações ligadas a doenças como a doença renal policística (PKD). Mutações em Nek8, como T162A, G442V e H425Y, cuja mutação afeta a localização e função, destacando a necessidade de uma compreensão mais profunda de suas interações proteicas. Este estudo tem como objetivo identificar interatores de Nek8 usando BioID (identificação de biotina dependente de proximidade), com foco em como as mutações de Nek8 alteram suas interações e localização. A abordagem inclui a clonagem do gene Nek8 completo, a criação de mutações e a transfecção de células de mamíferos para análise de proteínas. As interações serão analisadas por Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC/MS), fornecendo insights sobre as funções celulares do Nek8. Esperamos que este estudo aprofunde nossa compreensão da função de Nek8 no ciclo celular e na ciliogênese, com implicações para doenças genéticas como nefronoftise (NPHP) e doença renal policística (PKD).