Expressão e produção do dgM2-1 recombinante com e sem marcação isotópica com 15N para espectroscopia de fluorescência e medidas de 15N HSQC por RMN

• Processo: 25/03472-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Epidemiologia
• Pesquisador responsável: Ícaro Putinhon Caruso
• Beneficiário: Sérgio Luís Ferreira Júnior
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/13050-5 - Triagem de fragmentos e desenho racional de peptídeos miméticos para a busca de candidatos antivirais ao sítio de interação M2-1/fosfoproteína do Vírus Sincicial Respiratório humano, AP.R
• Assunto(s): Peptídeos Vírus sincicial respiratório humano
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: domínio globular da proteína M2-1 | Fragmentos | Interação proteína-ligante | peptídeos | produção de proteina recombinante | Vírus Sincicial Respiratório Humano | Virologia aplicada

Resumo

O Vírus Sincicial Respiratório humano (hRSV) é um dos principais causadores de doenças respiratórias agudas como bronquiolite e pneumonia em recém-nascidos, crianças e idosos. A proteína M2-1 do hRSV é um importante fator de antiterminação transcricional do complexo da polimerase viral. O papel da M2-1 no contexto desse complexo é determinado pela interação do seu domínio globular (dgM2-1) com o RNA mensageiro viral e a região dos resíduos 90-110 da fosfoproteína P (P90-110). Esse cenário de interações intermoleculares faz do dgM2-1 um potencial alvo para desenvolvimento de inibidores do ciclo de replicação viral. Nesse sentido, o presente projeto de pesquisa visa identificar ligantes (fragmentos e peptídeos) com potencial de inibição do sítio de interação do dgM2-1 com RNA e fosfoproteína viral. Para tal, serão empregadas as abordagens sistematizadas de triagem de fragmentos e desenho racional de miméticos do peptídeo P90-110, utilizando as técnicas experimentais de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e espectroscopia de fluorescência juntamente com simulações computacionais de docking molecular, dinâmica molecular e cálculos de energia livre de ligação. Portanto, o desenvolvimento do presente projeto contribuirá para a concepção de uma estratégia alternativa de combate às infecções causadas pelo hRSV tendo como alvo o dgM2-1, uma vez que seus resultados fornecerão informações moleculares relevantes para propostas de potenciais fármacos com ação antiviral contra esse vírus respiratório.