Imortalização e caracterização de fibroblastos dérmicos por superexpressão de hTERT

• Processo: 24/20827-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Ernesto da Silveira Goulart Guimarães
• Beneficiário: Heloisa Genovez Alcoforado Carneiro
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fibroblastos Biologia celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fibroblasto | hTERT | imortalização | Biologia Celular

Resumo

A falência de órgãos e/ou tecidos é responsável por 45% das mortes anuais no mundo. A bioengenharia de tecidos é uma solução atrativa, pois permite a fabricação de tecidos funcionais para transplantes. Os tecidos bioartificiais requerem células funcionais, sendo que as células primárias se enquadram como padrão ouro de funcionalidade, mas não são adequadas para longos cultivos in vitro. A transdiferenciação de fibroblastos dérmicos pode ser utilizada para gerar células de diferentes tecidos, porém sua capacidade proliferativa limitada, em decorrência da senescência replicativa, dificulta a modificação genética e cultivo a longo prazo necessárias nessa abordagem. A imortalização dos fibroblastos previamente à transdiferenciação pode facilitar as transfecções e permitir a geração de números suficientes de células para aplicação na engenharia de tecidos. Este trabalho tem como objetivo imortalizar fibroblastos dérmicos pela superexpressão de hTERT e caracterizar as linhagens geradas quanto ao escape à senescência, regulação do ciclo celular/proliferação e alterações cromossômicas. A inserção de hTERT será confirmada por PCR qualitativo. A caracterização das linhagens imortalizadas será realizada por citometria de fluxo, RT-qPCR e MLPA.