Caracterização molecular de coccídeos (Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Sarcocystis spp.) no sistema nervoso central, ocular e muscular de ovinos

• Processo: 25/04006-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Gustavo Felippelli
• Beneficiário: Maria Luísa Pitol Ramos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária (FMVA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Assunto(s): Coinfecção Reação em cadeia por polimerase (PCR) Saúde Única Sequenciamento Zoonoses Parasitologia veterinária
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Coinfecção | Pcr | Saúde Única | sequenciamento | Zoonoses | Parasitologia Veterinária

Resumo

A coinfecção de diversos coccídeos é constantemente investigada por possuírem órgãos de predileção similares, como por exemplo o sistema nervoso central e dividirem a mesma classe de hospedeiros definitivos (carnívoros) caracterizando um ciclo presa-predador. O presente trabalho terá como objetivo perscrutar o diagnóstico molecular de três parasitos da família Sarcocystidae que compartilham do mesmo hospedeiro intermediário, os ovinos (Ovis aries), esses protozoários são os seguintes: Toxoplasma gondii, Sarcocystis spp. e Neospora caninum sendo os dois primeiros zoonóticos e o último agente etiológico citado é a principal preocupação de perdas reprodutivas em ruminantes no geral, porém com apenas um relato sorológico em ser humano. Serão coletadas 100 cabeças de ovinos doados por frigorífico municipal situado na cidade de São Manuel, estado de São Paulo. As cabeças serão seccionadas para retirada do sistema nervoso central, ocular e muscular (masseter e língua), após a retirada serão armazenadas a temperatura de -20°C. Em seguida serão extraídos DNA das amostras do sistema nervoso central, de forma individual: cérebro, cerebelo e tronco, dos olhos (humor aquoso e retina), e das musculaturas supracitadas; especificamente da língua e masseter será realizado o diagnóstico parasitológico de Sarcocystis spp. Sendo assim, será realizado um protocolo de PCR convencional na região 18S para pesquisa integrada de DNA da Família Sarcocystidae (Toxoplasma gondii, Sarcocystis spp. e Neosporum caninum). As amostras positivas serão extraídas do gel pelo Kit QIAquick (Qiagen) para a purificação dos amplicons de PCR. Será realizado o sequenciamento genético de Sanger. As sequências de nucleotídeos serão analisadas pelo programa CodonCodeTM Aligner versão 9.0.1, o Bio EditTM Sequence Alignment Editor e Basic Local Aligment Search Tool - BLAST. Os dados resultantes do protocolo de PCR serão analisados por meio de teste qui-quadrado com o auxílio do software Jamovi 2.3.28 e Epi Info 7.2.6.0 a fim de determinar a prevalência das variáveis, serão consideradas estatisticamente significativas quando p ¿ 0,05.