Investigação da resistência à radiação ionizante (raios gamma) exibida por tripanosomas agentes etiológicos de doenças tropicais negligenciadas

• Processo: 24/21950-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marcelo Santos da Silva
• Beneficiário: Fernanda de Jesus Silva
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Dano ao DNA Leishmania major Radiação ionizante Reparo do DNA Trypanosoma brucei brucei Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: danos no DNA | Leishmania major | Radiação ionizante | reparo de DNA | Trypanosoma brucei | Trypanosoma cruzi | Biologia Celular e Molecular de tripanosomatídeos

Resumo

As infecções parasitárias são uma das principais causas de morbidade e mortalidade no mundo. Uma grande proporção dessas infecções em humanos e animais domésticos pode ser atribuída a tripanossomatídeos, incluindo Trypanosoma cruzi (agente etiológico da doença de Chagas) e Trypanosoma brucei (agente etiológico da doença do sono). O tratamento para essas doenças depende de medicamentos que apresentam efeitos colaterais e permitem a seleção de parasitos persistentes capazes de realizar eficiente reparo de DNA. Estudos evidenciam que tripanosomas apresentam alta resistência à radiação ionizante por raios gama (IR) quando comparado a outros eucariotos. No entanto, os mecanismos moleculares que orquestram essa incomum resistência à IR nesses parasitos permanecem elusivos. Além disso, a maioria dos estudos visando investigar a resistência à IR apresentada por T. brucei foram realizados a mais de duas décadas, quando o acesso a tecnologias em larga escala e ferramentas de bioinformática era escasso. Assim, algumas questões permanecem abertas: 1) Seria a resistência à IR, de fato, comum entre tripanosomas (T. cruzi e T. brucei) ou proeminente em T. cruzi? 2) Os mecanismos moleculares de resposta à IR são similares em T. cruzi e T. brucei? 3) Estes parasitos realizam um reparo de DNA mais eficiente ou parte da população apresenta algum mecanismo de proteção para evitar o dano no DNA? As respostas para essas questões poderão contribuir para uma melhor compreensão da diversificação dos mecanismos moleculares que permitem que esses parasitas sobrevivam a doses consideradas letais para células de mamíferos. Nesta proposta, pretendemos investigar comparativamente os mecanismos de resistência à IR exibida por T. cruzi e T. brucei. Inicialmente, pretendemos usar formas epimastigotas de T. cruzi e formas tripomastigotas procíclicas de T. brucei para realizar nossas análises. Baseado na literatura, nós assumimos (hipotetizamos) que T. cruzi será mais resistente em relação a T. brucei. Se essa hipótese suportar nossos ensaios, investigaremos a razão principal para este comportamento. Os ensaios cinéticos de irradiação serão realizados no IPEN-USP. Realizaremos ensaios de proliferação e viabilidade, análise de conteúdo de DNA e progressão da fase S por citometria de fluxo, detecção e reparo de danos no DNA por TUNEL e IFA usando ¿-¿H2A, e verificaremos genes relacionados a vias específicas de reparo de DNA expressos diferencialmente por RT-qPCR. Se nossa hipótese não suportar os ensaios experimentais, i.e.: T. cruzi e T. brucei apresentarem o mesmo nível de resistência a radiação ionizante, relataremos essa descoberta ao final do projeto. As descobertas obtidas com este projeto nos ajudarão a entender melhor a resposta a danos no DNA dos tripanossomas e podem abrir caminho para uma nova abordagem para combater as Doenças Tropicais Negligenciadas causadas por estes parasitos.