Impacto de TEAD4 sobre a atividade transcricional de HPV-16

• Processo: 25/06774-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Epidemiologia
• Pesquisador responsável: Laura Cristina Sichero Vettorazzo
• Beneficiário: Patricia Massabki Lomonaco
• Instituição Sede: Instituto do Câncer do Estado de São Paulo Octavio Frias de Oliveira (ICESP). Coordenadoria de Serviços de Saúde (CSS). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 24/13024-0 - Fatores de transcrição celular como biomarcador prognóstico e alvo terapêutico em tumores induzidos por papilomavírus humano 16 (HPV-16)., AP.R
• Assunto(s): Neoplasias do colo uterino Papillomavirus Transcrição Epidemiologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer cervical | Papillomavirus | Tead4 | transcricao | Epidemiologia Molecular

Resumo

O desenvolvimento de tumores associados à infecção por HPV decorre de infecções persistentes por HPVs de alto risco oncogênico, sendo o HPV-16 o mais prevalente no mundo todo tanto nas lesões pré-neoplásicas quanto nos cânceres de diferentes sítios anatômicos. As oncoproteínas E6 e E7 de HPVs de alto risco se associam e inativam, respectivamente, as proteínas supressoras de tumor p53 e pRb, o que resulta na evasão da apoptose, desregulação do ciclo celular entre outras alterações que em conjunto induzem a transformação das células infectadas. Na LCR viral se ligam diferentes FTs virais e celulares que regulam a replicação e transcrição dos HPVs. Ainda não existem tratamentos alvo-específicos com o intuito de conter a proliferação das células infectadas por HPV, desta forma limitando a progressão do quadro clínico. Assim, justifica-se a busca por biomarcadores prognósticos e as vias associadas a estes que possibilitem o desenvolvimento de tratamentos direcionados aos pacientes acometidos por tumores HPV-induzidos. TEAD4 (TEA domain transcription factor 4), também conhecido como TEF-3 (transcriptional enhancer fator-3) é um membro importante da família de FTs TEAD. TEAD4 é um fator transcricional a jusante da via de sinalização de Hippo, e possui papel relevante na proliferação e sobrevivência celular, regeneração de tecidos e manutenção de células-tronco. TEAD4 não impacta a atividade transcricional na ausência de cofatores críticos. Por exemplo, TEAD4 se liga às proteínas YAP/TAZ através de um domínio na região carboxi terminal, sendo ambas proteínas efetores importantes da via de sinalização Hippo. Alguns genes regulados pelo complexo TEAD-YAP/TAZ incluem survinina, vimentina, MYC e MMP9.Quando fosforiladas YAP e TAZ acumulam-se no citoplasma e não conseguem se ligar a TEAD, o que induz a proteólise de ambas mediada pela ubiquitina e/ou degradação induzida por autofagia; quando desfosforiladas, YAP e TAZ translocam-se para o núcleo, onde interagem com TEADs para induzir a transcrição de diversos genes envolvidos em proliferação, metástase e apoptose. Altos níveis de TEAD4 são detectados em diversos tecidos tumorais, sugerindo que esta proteína pode ter um importante papel como biomarcador prognóstico em diferentes tipos de tumor. Uma vez que a superexpressão de TEAD4 está correlacionada a baixa sobrevida, destaca-se a importância de desenvolver terapias antitumorais que tenham esta proteína como alvo. Foi recentemente demonstrado que a via de Hippo está ativamente envolvida no estabelecimento, desenvolvimento e manutenção de tumores relacionados com o HPV. Entretanto, o papel e o mecanismo da via YAP/TAZ-TEAD4 em câncer cervical ainda precisam ser esclarecidos.No nosso laboratório, em um screening, nós observamos que TEAD4 potencialmente induz a atividade transcricional de HPV-16. Ainda, análise in sílico indicou sítios de ligação putativos à LCR de HPV-16, indicando que este FT pode ter um papel importante na tumorigênese induzida por HPV por elevar os níveis das oncoproteínas E6 e E7. Entretanto, ensaios adicionais são necessários para a avaliação do impacto de TEAD4 sobre a transcrição viral no contexto de células imortalizadas por HPV-16. Pelo exposto, objetiva-se neste projeto: (1) Avaliar o impacto de TEAD4 sobre a atividade transcricional de HPV-16, em células transformadas por este vírus; (2) Avaliar o impacto de TEAD4 sobre a atividade transcricional de HPV-16, em células imortalizadas por este vírus. Para tanto, TEAD4 será superexpresso em diferentes células HPV positivas (SiHa e CasKi) empregando-se um plasmídeo em que a LCR de HPV-16 está a montante do gene da luciferase de vagalume. As medidas de luminescência serão utilizadas como medida indireta da atividade transcricional viral. A atividade transcricional medida será comparada à atividade basal, definida como referência e atribuída o valor 1.