Investigação in vitro e in vivo dos mecanismos de aquisição de resistência a terapias anti-KRAS em tumores pancreáticos

• Processo: 24/13580-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Renato José da Silva Oliveira
• Beneficiário: Abu-Bakr Adetayo Ariwoola
• Instituição Sede: Hospital do Câncer de Barretos. Fundação Pio XII (FP). Barretos , SP, Brasil
• Assunto(s): Técnicas in vitro Oncologia Oncologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ensaios in vitro | Ensaios In Vivo | Inibidores de Kras | Modelos de resistência | Oncogene KRAS | Oncologia | Oncologia Molecular

Resumo

A família de genes RAS, composta por KRAS, NRAS e HRAS, é a mais frequentemente mutada em cânceres, com destaque para o KRAS, que representa cerca de 75% das mutações nos genes RAS. Essas mutações desempenham um papel fundamental no desenvolvimento de câncer pulmonar, colorretal e pancreático, cujas altas taxas de mortalidade demandam a décadas a busca por maneiras eficazes de inibir a proteína KRAS. No entanto, devido à complexidade estrutural da proteína e outros fatores, essa tarefa era até recentemente considerada impossível. Após a identificação de porções "drogáveis" em algumas variantes do KRAS, tornou-se viável projetar inibidores mais potentes, seletivos e com melhor biodisponibilidade, como o MRTX1133 para a variante KRAS-G12D. Lamentavelmente, relatos na literatura já descreveram casos de resistência adquirida e, por conseguinte, falhas na resposta às terapias anti-KRAS. Portanto, este projeto se propõe a investigar, em uma abordagem pré-clínica, as alterações moleculares que levam à resistência ao MRTX1133, buscando uma solução terapêutica para este desafio. O projeto se dividirá em três etapas: (1) Criação de modelos de resistência ao inibidor de KRAS; (2) Identificação de marcadores de resistência à terapia anti-KRAS; (3) Avaliação de combinações terapêuticas capazes de restaurar a sensibilidade ao inibidor de KRAS. Para isso, quatro linhagens tumorais, mutantes para KRAS-G12D, serão continuamente expostas ao inibidor MRTX1133, com o objetivo de gerar clones resistentes, enquanto as alterações moleculares nos perfis de expressão gênica relacionados a vias de proliferação e resposta imune serão analisadas através de sequenciamento de RNA. Além disso, a expressão diferencial de proteínas entre clones resistentes e sensíveis será avaliada em relação às vias de sinalização mediadas por KRAS e de resposta imune por meio de arranjos proteicos (RRPA). Por último, propostas de combinações terapêuticas serão desenvolvidas para superar a resistência aos inibidores de KRAS, e a eficácia dessas combinações será avaliada por meio de ensaios celulares de proliferação, invasão, migração, formação de colônias, análise do ciclo celular e morte celular, utilizando modelos celulares em 2D, 3D e modelos xenográficos. Espera-se que esta plataforma de investigação pré-clínica possa identificar biomarcadores relacionados às falhas na terapia anti-KRAS e, ao mesmo tempo, demonstrar as melhores combinações terapêuticas para controlar o oncogene KRAS em pacientes que após falha aos inibidores de KRAS, não possuem opções de tratamento. (AU)