Gotículas lipídicas na resposta antiviral via viperina em células musculares esqueléticas infectadas com Chikungunya

• Processo: 25/05010-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Mariana Kiomy Osako
• Beneficiário: Beatriz Calasense de Campos
• Supervisor: Mark Harris
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Leeds, Inglaterra
• Vinculado à bolsa: 24/10834-0 - Gotículas lipídicas na resposta antiviral via viperina em células musculares esqueléticas infectadas com Chikungunya, BP.MS
• Assunto(s): Febre de Chikungunya Gotículas lipídicas Biologia celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chikungunya | Gotículas lipídicas | Viperina | Biologia celular

Resumo

O vírus Chikungunya (CHIKV) é um arbovírus que causa uma doença febril aguda com sintomas musculoesqueléticos persistentes, sem tratamentos específicos ou vacinas disponíveis. O músculo esquelético desempenha um papel fundamental na patogênese da doença. Embora a infecção desse tecido seja crucial para a patogênese e o desenvolvimento de sequelas, poucos estudos se concentraram nos mecanismos celulares subjacentes à infecção em células musculares esqueléticas. A viperina, uma proteína antiviral que se localiza no retículo endoplasmático e em gotículas lipídicas (LDs), demonstrou inibir a replicação do CHIKV, e sua expressão é aumentada após a infecção em fibroblastos e células musculares esqueléticas. Como estudos indicam que as propriedades antivirais da viperina estão intimamente relacionadas à presença de gotículas lipídicas, nossa hipótese é que esses organelos são importantes para o estabelecimento de uma resposta imune antiviral via viperina.Curiosamente, nossos dados preliminares indicam que a indução de gotículas lipídicas em mioblastos correlaciona-se com uma menor permissividade viral. Além disso, estudos recentes de nossos colaboradores mostram que a proteína nsp3 do CHIKV está localizada próxima a gotículas lipídicas em células hepáticas. De fato, nossos achados iniciais indicam a proximidade da nsp3 com gotículas lipídicas em miotubos, sugerindo que os papéis potenciais desses organelos na infecção pelo CHIKV ainda precisam ser explorados.Neste projeto, propomos utilizar um sistema de replicon não citotóxico do CHIKV, desenvolvido por nossos colaboradores, para avaliar a proximidade entre nsp3 e gotículas lipídicas em um contexto de replicação persistente, empregando microscopia de super-resolução e live cell imaging. Além disso, geraremos uma linhagem de células C2C12 knockout para viperina usando CRISPR-Cas9, a fim de avaliar seu papel na replicação viral e na dinâmica das gotículas lipídicas. Este estudo tem como objetivo elucidar o potencial antiviral das gotículas lipídicas e da viperina no músculo esquelético, fornecendo novas perspectivas sobre a patogênese do CHIKV e possíveis alvos terapêuticos.