Influência do receptor purinérgico p2x7 no sistema nervoso entérico de camundongos fêmeas knockout induzidos a colite ulcerativa experimental

• Processo: 24/20750-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2028
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: Patricia Castelucci
• Beneficiário: Lucas Casagrande
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Estrógenos Motilidade gastrointestinal Neuroinflamação Sistema nervoso entérico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estrogênio | motilidade gastrointestinal | Neuroinflamação | P2X7R | receptor purinérgico | Sistema Nervoso Entérico | sistema nervoso entérico

Resumo

A colite ulcerativa (UC) compromete o sistema nervoso entérico (SNE), afetando a motilidade intestinal. O receptor purinérgico P2X7 participa de vias inflamatórias e apoptóticas durante a UC. Hormônios sexuais femininos, como o estrogênio, podem modular essas respostas inflamatórias, principalmente por meio dos receptores estrogênicos ER¿ e ER¿. Este estudo visa investigar os efeitos da ausência do receptor P2X7 no SNE de camundongos fêmeas knockout (KO) com colite experimental, avaliando a neurotransmissão entérica e os efeitos do estrogênio. Serão utilizados 56 camundongos fêmeas da linhagem C57BL/6, divididos em sete grupos experimentais com 8 animais: wild type controle (WT controle), wild type ovariectomia (WT OVX), wild type colite (WT OVX colite), knockout controle (KO OVX controle), knockout colite (KO OVX colite), KO colite + agonista de ER¿ (PPT) (KO OVX Colite + ER¿) e KO colite + agonista de ER¿ (DPN) (KO OVX Colite + ER¿). Exceto o grupo WT controle, todos os animais serão ovariectomizados. A colite será induzida por TNBS, e os animais serão eutanasiados após sete dias. Serão realizadas análises imunohistoquímicas em preparações de membrana e culturas celulares para marcação de neurônios (HuC/D, ChAT, nNOS, Calbindina) e células gliais (GFAP, S100). Western blot será empregado para quantificação de P2X7, ER¿, ER¿, NF-¿B e caspase-3. A motilidade intestinal será analisada por banhos de órgãos com carbacol e nitroprussiato. A análise histológica do cólon incluirá PAS, ulcerações e infiltrado inflamatório. A expressão gênica será avaliada por PCR. Os dados serão analisados por ANOVA com nível de significância de 5%.