Produção, cristalização e determinação de estruturas cristalográficas da Diidrofolato reductase de Cryptococcus neoformans

• Processo: 25/13004-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcio Vinicius Bertacine Dias
• Beneficiário: Luiza Catarina Batista de Alvarenga
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 24/22643-5 - Caracterização estrutural, funcional e triagem por fragmentos para Diidrofolato redutases de fungos patogênicos invasivos, AP.R
• Assunto(s): Antifúngicos Cryptococcus neoformans Cristalografia de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antifolatos | Antifungicos | cristalização de macromoléculas | Cryptococcus neoformans | Diidrofolato Redutase | cristalografia de proteínas

Resumo

As doenças infecciosas são um dos grandes problemas de saúde pública mundial e atual. Entre estas encontram-se as doenças infeciosas causadas por fungos invasivos que levam a morte de um número elevado de pacientes, principalmente em ambientes hospitalares ou pessoas que sofrem de imunodeficiência. Há poucas alternativas para o tratamento dessas infecções e estas ainda estão associadas a fortes efeitos colaterais. Também há um crescente número de relatos de cepas resistentes aos antifúngicos utilizados. Assim, é urgente estudar alvos moleculares e também desenvolver novos antifúngicos para o controle dessas doenças, incluindo aquelas causadas por Cryptococcus neoformans. Este fungo geralmente causa infecções severas do sistema nervoso central em pacientes que apresentam imunossupressão. Nesse projeto, temos como objetivo estudar a enzima diidrofolato redutase (DHFR) desse patógeno. Para isso, pretendemos produzir a enzima heterologamente em sistema bacteriano, realizar a sua purificação, cristalização e determinação de sua estrutura tanto na presença da sua coenzima NADPH, como na presença de antifolatos. Ao final do projeto, esperamos obter informações cruciais sobre o modo de ligação dessas moléculas que possam contribuir para o desenvolvimento de moléculas específicas para o tratamento de infecções fúngicas (AU)