Levantamento topográfico de alta em resolução em células aderidas em matrizes de hidrogéis

• Processo: 25/11693-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Emerson Rodrigo da Silva
• Beneficiário: Kayky Novais Batista
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03056-6 - Caracterização ultraestrutural de nanoscaffolds bioativos, AP.PNGP.PI
• Assunto(s): Espectroscopia Microscopia de força atômica Materiais nanoestruturados Peptídeos Técnica de automontagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Espectroscopia | microscopia de força atomica | nanoestrutura | peptídeos | self-assembly | Biofísica Estrutural

Resumo

O desenvolvimento de scaffolds capazes de modular e estimular o crescimento celular é considerado um tema de fronteira com grandes impactos na medicina do futuro. Entre outras coisas, essas matrizes são visadas para o estímulo do crescimento tecidual e para a produção, por exemplo, de peles artificiais e córneas prostéticas. Naturalmente, um conhecimento aprofundado do modo de distribuição de células sobre essas matrizes e das estruturas membranares (e.g., microtúbulos) responsáveis pela fixação ao substrato é uma condição essencial para o pleno desenvolvimento da área. Uma das formas mais poderosas de se determinar essas informações com alto grau de detalhe é a microscopia de força atômica, que permite o levantamento de informação tridimensional em escala nanométrica. No entanto, a obtenção adequada de dados requer protocolos de preparação adequados já que não é trivial a realização de ensaios em células sob condições hidratadas, requerendo-se frequentemente a fixação das mesmas. Nesse projeto, pretendemos desenvolver um protocolo de fixação para observação de células crescidas sobre matrizes hidrogeladas peptídicias. Nosso objetivo será identificar quais as melhores condições e materiais para a obtenção de amostras viáveis, capazes de fornecer resultados de qualidade e reprodutíveis. O trabalho consistirá no cultivo de células (HeLa, NIH3T3 e bactérias) sobre corpos de prova recobertos com hidrogéis. Em seguida, haverá fixação com métodos tradicionais em microscopia (e.g., PFA, glutaraldeído) e as amostras serão analisadas via AFM. As condições tanto de preparo da amostra quanto de configuração do equipamento deverão ser otimizadas para se obter dados de qualidade.