PAPEL DE miR-539-5p NA REGULAÇÃO DE GENES IMPORTANTES PARA A PROGRESSÃO TUMORAL EM LINHAGENS CELULARES DE CÂNCER DE TIREOIDE

• Processo: 25/12908-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Murilo Vieira Geraldo
• Beneficiário: Júlia Porto Nogueira da Gama
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): MicroRNAs Biologia celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: MicroRNAs | Neoplasias da glândula tiroide | Biologia Celular

Resumo

Introdução: MicroRNAs (miRNAs), moléculas pequenas de RNA não codificadores de proteínas, vêm sendo relacionados à progressão e desenvolvimento de diversos tumores, devido ao seu papel de potentes reguladores pós-transcricionais da expressão gênica. Estudos prévios de nosso grupo demonstraram a diminuição da expressão de miRNAs oriundos da região DLK1-DIO3, em amostras de carcinoma papilar de tireoide (PTC). Análises computacionais indicam papel dos miRNAs dessa região, incluindo miR-539-5p, em processos como proliferação, migração, invasão celular e angiogênese, sendo promissores supressores tumorais. Objetivo: Assim, o presente estudo tem como objetivo construir um modelo de superexpressão de miR-539-5p em linhagens celulares tireoidianas tumorais para a avaliação da influência desse miRNA em alvos que se relacionam à progressão tumoral através dos processos citados anteriormente. Método: Realizaremos a construção do modelo de superexpressão em plasmídeo, a partir da amplificação da sequência genômica de miR-539-5p com oligonucleotídeos específicos contendo sítios para enzimas de restrição e ligação em plasmídeo pMSCV previamente digerido com as mesmas enzimas. A construção será transformada em bactérias competentes por choque térmico e subsequentemente o DNA plasmidial será extraído. Por fim, o plasmídeo construído (pMSCV-539) será transfectado em linhagens tumorais tireoidianas, que serão selecionadas com antibiótico e expandidas para análise da influência deste miRNA sobre a expressão de alvos identificados bioinformaticamente. (AU)