Desenvolvimento de um biossensor eletroquímico para detecção do peptídeo opioide BCM-7 da proteína A1 do leite

• Processo: 25/05727-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2026
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2028
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Eduardo Festozo Vicente
• Beneficiário: Lorenza Eivazian Vianna Nogueira Brandão
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências e Engenharia. Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Tupã. Tupã , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06706-9 - Peptídeos antimicrobianos: expandindo horizontes para otimização da performance na produção animal, AP.JP2
• Assunto(s): Técnicas biossensoriais Cromatografia líquida de alta eficiência Expressão de proteínas Peptídeos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bcm-7 | Beta-caseína A1 | biossensor | Clae | Expressão de proteínas | peptídeo | Biossensores

Resumo

O Brasil é o quarto maior produtor de leite do mundo, e no ano de 2023 o país produziu cerca de 24,52 bilhões de litros de leite cru de vaca. Contudo, o mercado consumidor desse alimento está cada vez mais exigente devido à alta incidência de restrições alimentares. Cerca de 40% da população tem tendência a desenvolver intolerância à lactose (CID E73) no Brasil, e isso faz com que a procura por medicamentos que contém a enzima lactase aumente cada vez mais. Porém, em alguns casos, os sintomas não cessam mesmo com a ingestão do medicamento. Visto isso, estudos tem mostrado que o peptídeo ¿-casomorfina-7 (BCM-7), liberado durante a ingestão da proteína ¿-caseína A1 presente no leite de vacas com genótipo A1A1 ou A1A2, pode levar a efeitos que favorecem a inflamação e motilidade gastrointestinal. Além deste, em alguns indivíduos, o BCM-7 ativa o neuropeptídeo/receptor µ-opióide denominado ¿-endorfina, encontrado no trato gastrointestinal, e provoca efeitos similares ao uso de entorpecentes. Diante disso, o presente estudo, terá como objetivo inicial sintetizar in vitro as proteínas A1 e A2 por meio da técnica da Síntese Peptídica em Fase Sólida (SPFS). Em seguida, a proteína A1 será submetida a digestão enzimática com a enzima elastase, responsável pela clivagem sítio-específica que produz o peptídeo BCM-7, para ser identificada nas amostras de leite e nos produtos lácteos. O próximo passo será desenvolver um biossensor eletroquímico capaz de detectar a proteína A1 no leite de vacas. Além disso, será verificado se o biossensor consegue identificar o BCM-7 em leite após digestão enzimática. A validação do estudo incluirá testes individuais com vacas genotipadas (A1A1, A1A2 e A2A2) e por meio de testes de sensibilidade usando amostras diluídas serialmente de leite A1 em leite A2 e de proteínas A1 e A2 sintetizadas em laboratório. Os testes de sensibilidade também serão realizados em amostras de produtos lácteos, como queijos e iogurtes. Finalmente, a sensibilidade do biossensor será avaliada em comparação com testes baseados em DNA. (AU)