Clonagem e expressão de um anticorpo (IgGk) anticélulas NK murinas em Saccharomyces cerevisiae

• Processo: 98/14734-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
• Pesquisador responsável: Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior
• Beneficiário: Roberta de Assis Maia
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Engenharia genética Anticorpos Clonagem Células matadoras naturais Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulas Nk | Clonagem | Engenharia De Anticorpos

Resumo

O presente projeto situa-se no campo da engenharia genética de anticorpos visando a expressão de anticorpos monoclonais em sistemas heterólogos, neste caso a levedura S. cerevisiae. Faremos a subclonagem de cDNAs de cadeia leve tipo kappa e de cadeia pesada IgE2a provenientes de um hidridoma murinho (PK136 anti-NK1.1) que secreta anticorpo monoclonal anti células NK (anti CD3), inserindo estes cDNAs no vetor de expressão de levedura pYES-2 (In Vitro Gen). Co-transformantes de levedura, contendo ambos os cDNAs, serão avaliados quanto à expressão da imunoglobulina. O anticorpo secretado pelas leveduras transgênicas serão avaliados quanto à funcionalidade de reconhecimento de células NK (CD3+) murinas. (AU)