Expressão e localização celular de elf2-alfa do Trypanosoma cruzi

• Processo: 07/50564-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sergio Schenkman
• Beneficiário: Erik Halcsik
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/03303-2 - A estrutura nuclear no controle do ciclo celular e diferenciação do Trypanosoma cruzi, AP.TEM
• Assunto(s): Proteínas Biossíntese de proteínas Fosforilação Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celula | Elfa-Alfa | Proteina | Traducao | Trypanosoma Cruzi

Resumo

Em células de eucariotos, fatores de estresse celular regulam a síntese de proteínas através de sistemas de sinalização intracelular que levam à fosforilação da subunidade alfa do fator de iniciação de tradução 2 (e.F2a). Esta fosforilação impede que haja a troca GDP para GTP necessária para a formação do complexo eiF2-tRNA iniciador que irá encontrar o códon de iniciação AUG no RNA mensageiro. Uma das proteínas quinases específicas que são ativadas e fosforilam está sub-unidade está no retículo endoplasmático e é ativada quando proteínas recém sintetizadas não estão bem dobradas. Identificamos e caracterizamos uma quinase com função semelhante à PERK localizada na bolsa flagelar de Trypanosoma brucei. No Trypanosoma cruzi, o agente causador da doença de Chagas, a proteína ortóloga a esta quinase tem localização flagelar, local onde ainda não foi demonstrada haver síntese protéica. Neste projeto pretendemos assim detectar a expressão de elf2-alfa de T. cruzi bem como localiza-la no parasita e determinar se há diferenças no seu estado de foforiação em diferentes localizações celulares. Para isto, utilizaremos anticorpos anti-elF2a de T, cruz, e anti-peptídeo fosforilado correspondente a esta proteína em ensaios de imunofluorescência e imunoblot. (AU)