Caracterização do eixo adiponectina-PGE2-UEGF e a produção de esteroides em células da granulosa de suínos

• Processo: 04/14945-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Paula de Carvalho Papa Keohane
• Beneficiário: Danila Barreiro Campos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/07392-7 - Expressão do VEGF e bFGF na placenta bovina e seus efeitos sobre a produção de hormônios esteróides neste órgão, AP.JP
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adiponectina | Celulas Granulosas De Suinos | Cox-2 | Esteroides | Prostaglandinas | Vegf

Resumo

A adiponectina, proteína derivada do tecido adiposo, tem surgido como importante modulador de eventos reprodutivos, estimulando a expressão do RNAm da enzima COX-2, a qual participa da biossíntese de prostaglandinas e tem papel fundamental na reprodução entre outros eventos fisiológicos e patológicos. A PGE2 é importante fator estimulador do VEGF, o qual modula a angiogênese ovarina, bem como os processos de esteroidogênese desse órgão. O presente estudo tem como objetivo investigar os efeitos da adiponectina na produção de PGE2 e VEGF, e possíveis efeitos na esteroidogênese nas células da granulosa em suínos, bem como elucidar os mecanismos envolvidos no estímulo da transcrição da enzima COX-2. Para tanto, células da granulosa serão tratadas com adiponectina para a determinação das concentrações de PGE2 e VEGF. A presença do receptor de PGE2 do subtipo EP-2 será verificada nas células da granulosa e estas serão tratadas com adiponectina suína, um inibidor da PKA (H89) e um antagonista do receptor EP-2 (AH6809), para verificar o envolvimento da PGE2 na produção de VEGF em resposta à adiponectina Células da granulosa serão tratadas com VEGF e serão determinadas as concentraçãos de esteroides e a expressão da enzimas esteroidogênicas (P450scc, 3f3-HSD, 17f3-HSD e P450arom). E finalmente, visando à identificação de possíveis fatores de transcrição assim como fatores epigenéticos envolvidos na ativação da transcrição de COX-2 em resposta a adiponectina, a região promotora de COX- 2 será clonada em suínos, e então transfectada em células da granulosa usando um vetor contendo o gene repórter luciferase para a realização de ensaios da atividade promotora, incluindo estudos de deleção e mutação deste promotor, assim como a técnica de ChIP. (AU)