Clonagem, expressão e determinação da estrutura tridimensional de toxinas ativas em canais de K+ para o estudo da relação estrutura-função

• Processo: 03/01921-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Anete Pereira de Souza
• Beneficiário: Eliana Guedes Stehling
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Canais De Potassio | Espectroscopia De Massa | Estrutura Tridimensional | Expressao Heterologa | Ressonancia Magnetica Nuclear | Toxinas

Resumo

Algumas frações polipeptídicas, isoladas do veneno de diversas espécies de escorpião, se mostraram capazes de bloquear diferentes tipos de canais de K+ de forma reversível. Os canais de K+ são relacionados às importantes processos celulares como: regulação e manutenção do potencial de membrana, regulação do volume celular, secreção hormonal, geração e propagação de impulsos elétricos. Atualmente as aplicações terapêuticas de moduladores da atividade de canais de K+ estão limitadas a áreas especificas como cardiologia, doenças auto-imunes e transplantes. Porém, existem claras evidências das potencialidades do uso biomédico dessas substâncias. Visando desenhar toxinas que possam ter aplicação terapêutica é fundamental esclarecer os mecanismos moleculares envolvidos na afinidade e seletividade das mesmas a diferentes canais de K+. Para isso, pretende-se selecionar toxinas de escorpião descritas na literatura sem estrutura tridimensional esclarecida. As toxinas selecionadas serão obtidas por expressão heteróloga em E. coli e a estrutura tridimensional em solução será elucidada por espectrometria RMN e de massa. Dessas toxinas, utilizando técnicas de modelagem molecular, serão projetados mutantes que potencialmente possam apresentar maior afinidade e seletividade aos canais. Eles também serão expressos e a estrutura e atividade avaliada. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

STEHLING, ELIANA G.; SFORCA, MAURICIO L.; ZANCHIN, NILSON I. T.; OYAMA, JR., SERGIO; PIGNATELLI, ANGELA; BELLUZZI, OTTORINO; POLVERINI, EUGENIA; CORSINI, ROMINA; SPISNI, ALBERTO; PERTINHEZ, THELMA A.. Looking over Toxin-K+ Channel Interactions. Clues from the Structural and Functional Characterization of alpha-KTx Toxin Tc32, a Kv1.3 Channel Blocker. BIOCHEMISTRY, v. 51, n. 9, p. 1885-1894, MAR 6 2012. (00/10266-8, 01/08095-3, 00/02026-7, 03/01921-0, 99/07574-3, 99/11030-9)