| Processo: | 10/05567-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Data de Início da vigência: | 01 de agosto de 2010 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2011 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas |
| Pesquisador responsável: | Maria de Lourdes Corradi Custodio da Silva |
| Beneficiário: | Diego Tadeu Degli Exposti |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências e Tecnologia (FCT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Presidente Prudente. Presidente Prudente , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Ascomicetos Verticillium Biomassa microbiana Polissacarídeos Cromatografia líquida de alta pressão Ressonância magnética nuclear |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Biomassa de fungos | cromatografia líquida de alta pressão | polissacarídeos | Rmn | Química de carboidratos |
Resumo Considerando que o micélio fúngico pode constituir uma importante fonte de compostos químicos, incluindo os polissacarídeos, a obtenção, o conhecimento da estrutura e atividade biológica de tais moléculas poderá contribuir para a utilização prática e racional da biomassa produzida a partir do cultivo do microrganismo. Esse trabalho terá como objetivo estudar a biomassa do Verticillium lechani, cultivado neste laboratório.Para obtenção dos polissacarídeos a biomassa será lavada com água destilada, exaustivamente, até que nenhum resíduo de açúcar livre seja detectado pelo método do fenol-ácido sulfúrico, garantindo a total remoção do EPS. A massa micelial será seca, fragmentada e submetida, consecutivamente, a três diferentes procedimentos extrativos: água fria (3x), água fervente (3x) e hidróxido de potássio a 2% (1x). Essas extrações separarão as biomoléculas em grupos, de acordo com suas solubilidades.A purificação dos extratos polissacarídeos será efetuada por processos repetidos de congelamento e descongelamento, precipitação por formação de complexo solúvel e insolúvel em Cu2+ (Precipitação com solução de Fehling) e cromatografia de filtração em gel, entre outros. As etapas de purificação serão monitoradas pelo perfil cromatográfico obtido por cromatografia de gel permeação e/ou exclusão estérica acoplada à detecção por índice de refração. Essa técnica também será utilizada para a determinação da massa molecular dos polissacarídeos, após estarem puros, por comparação a padrões de polissacarídeos, tais como dextrana. Tendo em vista que a caracterização estrutural de polissacarídeos é de grande importância para se entender os efeitos biológicos apresentados por esta classe de polímeros, a presente pesquisa visa, também, a elucidação estrutural dos polissacarídeos utilizando as técnicas convencionais em química de carboidratos tais como hidrólise, metilação e ressonância magnética nuclear de carbono treze e próton, uni- e bidimensionais. | |
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