Clonagem, expressão e caracterização da atividade inibitória de uma serpina de cana-de-açúcar

• Processo: 07/07776-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Luciano Puzer
• Beneficiário: Marcelo Yudi Icimoto
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 06/53607-6 - Clonagem, expressão e estudo de especificidade das calicreínas teciduais humanas hK5 e hK7, AP.JP
• Assunto(s): Cana-de-açúcar Enzimologia Enzimas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cana-de-açúcar | enzimas | Inibidores Proteicos | Serino Protease | Serpina | Enzimologia

Resumo

A co-evolução levou ao surgimento de diversos mecanismos de defesa em plantas, que em sua maioria estão relacionados na defesa contra fungos e insetos. Esses mecanismos de defesa utilizam diferentes estratégias para combater as pragas invasoras; dentre estes, os inibidores de enzimas proteolíticas são um dos mais utilizados. Uma busca inicial no banco de dados do genoma da cana-de-açúcar (Saccharum officinarum) mostrou a presença de pelo menos um gene codificando para uma serpina, que são inibidores de serino peptidases. As serpinas vêm sendo relacionadas à importantes mecanismos de controle fisiológicos e, em plantas, também são descritas como estando envolvidas na defesa contra o ataque de patógenos. Neste projeto pretendemos clonar esta serpina da cana-de-açúcar no vetor de expressão pET28a(+) e expressá-la em células de E. coli. da linhagem roseta. Posteriormente, mediremos sua atividade inibitória frente à serino peptidases