Estudo da regulação da atividade do promotor de THI1 em Arabidopsis thaliana e seu uso potencial em vetores de expressão de proteínas heterólogas

• Processo: 01/07051-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marie-Anne Van Sluys
• Beneficiário: Denise Teixeira Ribeiro
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/11119-7 - Reparo de DNA lesado e conseqüências biológicas, AP.TEM
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Tiamina Arabidopsis thaliana Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Regulacao | Regulacao Genica | Tiamina | Vetor De Expressao

Resumo

O gene THI1 de Arabidopsis thaliana é um gene envolvido na biossíntese de tiamina e no processo de reparo de DNA. Além disso, possui duplo sinal de direcionamento, para cloroplastos e mitocôndrias. Pretende-se neste projeto estudar a regulação deste gene a partir da análise da atividade do promotor, fusionado ao gene repórter GUS e introduzido em thaliana por transformação com Agrobacterium tumefasciens. A análise molecular do padrão de integração no genoma e a análise da expressão de GÚS poderão trazer informações sobre a distribuição espacial e temporal da atividade do promotor THI1, bem como a resposta a fatores ambientais, tais como presença e ausência de luz. Pretende-se também verificar a capacidade de ligação in vitro de fatores de transcrição relacionados à regulação por luz ao promotor de THI1. A atividade deste promotor será também avaliada no sistema heterólogo de cenoura, verificando seu potencial de uso na expressão de proteínas heterólogas. Temos como objetivo construir um cassete de expressão utilizando o promotor de THI1 com as sequências de direcionamento para organelas, para a produção de proteínas de interesse biomédico. (AU)