Identificacao de proteinas que interagem fisicamente com o fator de inicio de traducao de eucariotos 5a (eif5a).

• Processo: 03/07235-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sandro Roberto Valentini
• Beneficiário: Ronaldo Souza de Barros
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14948-4 - Fator de iniciação de tradução de eucariotos - 5a(eIF-5A) e o metabolismo de RNA mensageiro, AP.JP
• Assunto(s): Saccharomyces cerevisiae Fator de iniciação 5A em eucariotos Duplo-híbrido TIF51A
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Duplo-Hibrido | Elf5A | Gst-Pulldown | Interacao Fisica | Saccharomyces Cerevisiae | Tif51A

Resumo

O fator de início de tradução 5A (elFSA) é altamente conservado desde arquebactérias até mamíferos. Este fator tem sido envolvido com início de tradução, transporte nucleocitoplasmático, decaimento de RNAm e proliferação celular, mas o seu papei nestes processos ainda é desconhecido. A levedura S. cerevisiae possui dois genes que codificam para elF5A chamados de TIF51A e TIF51B, expressos, respectivamente, em condições aeróbicas e anaeróbicas. O gene TIF51A é essencial para a viabilidade celular na presença de oxigênio. Utilizando o sistema DupLEX-A (OriGene Technologies), a proteína elF5A em fusão com o domínio de ligação ao DNA (a proteína LexA) funcionará como isca em um rastreamento que utiliza uma biblioteca de cDNA não amplificada e induzível fundida ao domínio acídico "blob" B42 (um fator de ativação da transcrição). As interações descobertas através do duplo híbrido serão confirmadas utilizando copurificação de proteína em fusão com GST (GST-pulldown). A procura de proteínas que venham a interagir fisicamente no sistema de duplo-híbrido descrito acima poderá revelar parceiras de elF5A de função conhecida, os quais venham a contribuir para um melhor entendimento do papel deste fator no metabolismo celular. (AU)