Desenvolvimento de metodologias por eletroforese capilar espectrometria de massas para análise de metabólitos relacionados a os relacionados a desordens do metabolismo humano

• Processo: 04/15980-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Etelvino José Henriques Bechara
• Beneficiário: Nilson Antonio de Assunção
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 01/09641-1 - Radicais livres e espécies excitadas em doenças metabólicas e bioluminescência, AP.TEM
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eletroforese Capilar | Espectrometria De Massas | Metabolismo | Metabolitos | Oxidacao Aerobica

Resumo

Neste projeto pretende-se contribuir com estudos mecanisticos e metodológicos para elucidação das bases moleculares de doenças em que metabólitos das classes de beta-aminocetonas e beta-cetoésteres têm papel determinante, tais como nos casos de porfiria aguda intermitente (PAI), tirosinemia hereditária tipo I, treoninemia, diabetes e cetoacidoses. Pelo menos in vitro, tem-se demonstrado que estes metabólitos, quando oxidados por oxigênio molecular em reações iniciadas por peroxinitrito e hemeproteínas/H2O2, tais como peroxidases e citocromo c, são produtoras de intermediários reativos radicalares e a-dicarbonílicos. Estes estudos mecanisticos serão conduzidos através do uso de eletroforese capilar nas suas diferentes modalidades ambas acopladas a espectrometria de massas. O trabalho está centrado no desenvolvimento de métodos utilizando a eletroforese capilar acoplada à espectrometria de massas para identificação estrutural inequívoca dos produtos destes metabólitos em estudos in vitro e, eventualmente in vivo, para o entendimento de possíveis rotas mecanísticas de sua formação. Durante o tempo de espera da importação do equipamento de espectrometria de massas será executado um sub-projeto no qual será estudada a acilação de nucleosídeos e DNA por metabólitos alfa-dicarbonílicos na presença de peroxinitrito. (AU)