Produção de anticorpos monoclonais contra príon celular e sua utilização no mapeamento de domínios desta proteína com atividade neuritogênica

• Processo: 98/15699-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 1999
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Pesquisador responsável: Vilma Regina Martins
• Beneficiário: Leandro Guimarães Garcia
• Instituição Sede: Instituto Ludwig de Pesquisa sobre o Câncer (ILPC). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Anticorpos monoclonais Príons Plasmócitos Camundongos knockout
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos Monoclonais | Celulas Pc-12 E Hipocampais | Neuritogenese | Proteina Do Prion Celular

Resumo

Nosso intuito é produzir anticorpos monoclonais contra várias regiões do príon celular através de fusão de plasmócitos de camundongo nocaute para a proteína do príon celular previamente imunizados contra esta proteína. As várias colônias geradas da fusão serão isoladas quanto à capacidade de produzir anticorpos contra esta proteína, que será obtida a partir da expressão da mesma em E. coli. Os anticorpos produzidos contra o príon celular serão avaliados quanto à sua capacidade de se ligar a peptídeos contendo a sequência desta proteína do primeiro ao último aminoácido com tamanho de vinte aminoácidos cada peptídeo. Estes anticorpos monoclonais mapeados serão então incubados com células PC-12 e células de hipocampo de embriões de rato e estes ensaios serão comparados com ensaios sem o anticorpo com base no número de neuritos formatos; se este anticorpo inibir a neuritogênese isto é um forte indicativo de que a região do príon mapeada por este anticorpo está relacionada com neuritogênese. (AU)