Producao de mutantes de xanthomonas axonopodis pv. citri e selecao in planta para alteracao de patogenicidade.

• Processo: 04/07601-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Alexandre Morais Do Amaral
• Beneficiário: Cesar Bueno de Souza
• Instituição Sede: Instituto Agronômico (IAC). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Genomas Cancro (doença de planta) Xanthomonas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancro Citrico | Genoma | Xanthomonas

Resumo

Para o entendimento do cancro cítrico, é fundamental a utilização de recursos que permitam o estudo das funções envolvidas na patogenicidade de seu agente causar, a bactéria Xanthomonas axonopodis pv. citri. Com a disponibilidade das seqüências genéticas da bactéria e com a produção de mutantes funcionais, tem sido possível o desenvolvimento de ensaios capazes de identificar importantes genes associados à sua virulência. Quando a produção de mutantes é baseada na técnica de mutagênese randômica, há a necessidade da localização do ponto em que ocorreu esta alteração ao longo do conjunto de genes e, por conseqüência, da seqüência interrompida. Uma alternativa bastante interessante para tal localização é a do TAIL-PCR" (Thermal Asymetric Interiaced PCR), que permite seqüenciar as regiões que flanqueiam o sítio de inserção através de reações sucessivas de amplificação. Supõe-se que o uso do método, com ajustes das reações de amplificação, é viável para a localização de regiões de inserção de transposon em DNA genômico da bactéria do cancro cítrico. Baseado no exposto, o presente projeto tem como objetivo verificar a possibilidade do uso do método TAIL-PCR na identificação destes sítios de mutação em X. axonopodis pv. citri. Para tal, o DNA genômico de mutantes da bactéria com transposon inserido será isolado e, após a avaliação de condições de amplificação baseadas na técnica TAIL-PCR, será realizado o seqüenciamento e verificação da utilidade do método, através das seqüências geradas. (AU)